コレシストキニン塗布によるかゆみの制御と新規治療薬への応用

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22659208
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 皮膚科学
• 研究機関: 浜松医科大学
• 研究代表者: 戸倉 新樹 浜松医科大学, 医学部, 教授 (00172156)
• 研究分担者: 森 智子 産業医科大学, 医学部, 助教 (80399203)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2011
• キーワード: コレシストキニン / かゆみ / 神経ペプチド / 肥満細胞 / 角化細胞 / 血管内皮細胞 / サブスタンスP / CCK2R

研究概要

かゆみは中枢性と末梢性に分けられる。末梢性のかゆみ機序は、(1)肥満細胞と知覚神経C線維との相互作用、(2)表皮角化細胞や真皮線維芽細胞により産生される因子によるC線維の伸長と反撥、(3)炎症に伴うT細胞や好酸球の産生物質による。特に(1)は直接かゆみに関わり、肥満細胞が放出するヒスタミン、トリプターゼはこれらの受容体(H1R、PAR-2)を介してC線維を刺激し活性化C線維は神経ペプチド(サブスタンスP[ SP]など)を放出してこの受容体(NK1)を持つ肥満細胞をさらに刺激する。加えて、温熱刺激などを知覚するTRP受容体もかゆみ知覚にバリエーションを与えている(Steinhoff M et al : J Invest Dermatol126 : 1705-18, 2006)。近年中枢性のかゆみはオピオイド受容体のアンタゴニスト、アゴニストにより新薬が導入された。しかし末梢性のかゆみは抗ヒスタミン薬以降、TRP受容体のアンタゴニストが開発されつつあるが、新規薬に乏しい。我々は、表皮培養角化細胞をSPで刺激後、RNAを抽出しマイクロアレイ解析した結果、SP刺激でCCK2Rが最も強く発現することをセレンディピティ的に見いだした。かゆみ惹起神経ペプチドであるサブスタンスP(SP)刺激によってコレシストキニン受容体であるCCK2発現亢進がみられたことは、CCKがCCK2Rシグナリングを介して、負の制御としてかゆみ抑制作用を示す可能性を示唆した。ICRマウスの背部を剃毛し、そこにSP(100nm/部分)を皮下注し、マウスの後肢掻破行動を誘導した。SP皮下投与10分前に剃毛部に種々のCCKペプチドを塗布し、溶液のみのコントロールと比べたところ、掻破回数がとくにCCK8Sで減弱した。CCK皮下投与でも同様の効果をもたらすか、SPと同時にCCK8Sを皮下投与したところ掻破回数が減弱した。皮下投与でもかゆみ抑制効果を示すのであれば、角化細胞以外に肥満細胞も標的細胞となることが示唆された。マウス胎仔由来肥満細胞をcompound 48/80で脱顆粒刺激する系で、CCK8Sを添加したところ脱顆粒は抑制された。以上のことから、CCKはかゆみを抑制する能力をもち、少なくとも肥満細胞の機能を抑制して効果を示すのではないかと考えられた。加えて、ヒトケラチノサイトのインターフェロン-γ刺激によるIL-8産生系においてCCK8Sは抑制作用を有した。さらにヒト血管内皮細胞においてインターフェロン-γ刺激によるICAM-1発現をも抑制した。以上のことからCCK-CCR2R系によるかゆみ抑制は、肥満細胞のみならず、ケラチノサイトや血管内皮細胞における炎症抑制効果によってももたらされることが明らかとなった。CCKのかゆみ治療薬としての可能性について特許申請しており、創薬への端緒となった。実際の薬剤としてはCCK2Rに結合できる単純化学物質が望まれるが、今後その探索が重要となる。

研究成果

• [雑誌論文] Topical cholecystokinin depresses itch-as sociated scratching behavior in mice (2011)
  • 著者名/発表者名: Fukamachi S, Mori T, Sakabe J-I, Shirai shi N, Kuroda E, Kobayashi M, Bito T, Kabashima K, Nakamura M, Tokura Y
  • 雑誌名: J I nvest Dermatol 巻: 131 ページ: 956-961
  • 査読あり
• [雑誌論文] Modulation of semaphorin 3A expression by calcium concentration and histamine in human keratinocytes and fib roblasts (2011)
  • 著者名/発表者名: Fukamachi S, Bito T, Shiraishi N, Koba yashi M, Kabashima K, Nakamura M, T okura Y
  • 雑誌名: J Dermatol Sci 巻: 62 ページ: 118-123
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficacy of combined topical treatment of acne vul garis with adapalene and nadifloxacin : A randomized study (2011)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi M, Nakagawa T, Fukamachi K, Nakamura M, Tokura Y
  • 雑誌名: J Dermatol 巻: 38 ページ: 1163-1166
  • 査読あり
• [雑誌論文] Downmodulatory effects of cetirizine and levocetirizine on cytokine/chemokine production and C D54 expression in keratinocytes (2011)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi M, Tokura Y
  • 雑誌名: J Derm atol 巻: 38 ページ: 717-719
  • 査読あり
• [雑誌論文] Characterization of Peripheral Natural Killer Cells and their Reduction in Drug-induce d Hyper-sensitivity Syndrome (2011)
  • 著者名/発表者名: Sugita K, Kabashima K, Tokura Y
  • 雑誌名: Acta Der m Venereol 巻: 92 ページ: 83-84
  • 査読あり
• [雑誌論文] Increased expression of mRNAs for I L-4, IL-17, IL-22 and IL-31 in skin lesi ons of subacute and chronic forms of pr urigo (2011)
  • 著者名/発表者名: Park K, Mori T, Nakamura M, Tokura Y
  • 雑誌名: Eur J Dermatol 巻: 21 ページ: 135-136
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inflammatory cytokine expression in the skin lesions of tumour necrosis factor receptor-associated periodic syndrome (2011)
  • 著者名/発表者名: Ohmori S, Nakamura M, Hino R, Kobayashi M, Tokura Y
  • 雑誌名: Rheumatology 巻: 51 ページ: 196-199
  • 査読あり
• [雑誌論文] High-Mobility Group Box 1 Protein(HMGB1) as a N ovel Diagnostic Tool for Toxic Epiderma l Necrolysis and Stevens-Johnson Syndro me (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakajima S, Watanabe H, Tohyama M, Sugita K, Iijima M, Hashimoto K, Tokur a Y, Nishimura Y, Doi H, Tanioka M, Miyachi Y, Kabashima K
  • 雑誌名: Arch Dermatol 巻: 147 ページ: 1110-1112
  • 査読あり
• [雑誌論文] Epiletic seiz ures and cholinergic urticaria with gener alized hypohidrosis and anhidrosis (2011)
  • 著者名/発表者名: Sawada Y, Bito T, Kabashia R, Sugita K, Nakamura M, Tokura Y
  • 雑誌名: Eur J Dermatol 巻: 21 ページ: 99-100
  • 査読あり
• [雑誌論文] A c ase of cholinergic urticaria associated wit h acquired generalized hypohidrosis and reduced acetylcholine receptors : cause an d effect? (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakamizo S, Kurosawa M, Sawada Y, T okura Y, Miyachi Y, Kabashima K
  • 雑誌名: Clin Exp Dermatol 巻: 36 ページ: 559-560
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inducible Nitric Oxide Synthase Downmodulates Contact Hypersensitivity by Suppressing Dendritic Cell Migration and Survival (2010)
  • 著者名/発表者名: Sugita K, Kabashima K, Yoshiki R, Iken ouchi-Sugita A, Tsutsui M, Nakamura J, Yanagihara N, Tokura Y
  • 雑誌名: J Inves t Dermatol 巻: 130 ページ: 464-471
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparison of skin barrier function and sensory nerve electric current perception threshold between IgE-high extrinsic and IgE-normal intrinsic types of atopic dermatitis (2010)
  • 著者名/発表者名: Mori T, Ishida K, Mukumoto S, Yamada Y, Imokawa G, Kabashima K, Kobayas hi M, Bito T, Nakamura M, Ogasawara K, Tokura Y
  • 雑誌名: Br J Dermatol 巻: 162 ページ: 83-90
  • 査読あり
• [雑誌論文] Involvement of Wnt signaling in dermal fibroblasts (2010)
  • 著者名/発表者名: Kabashima K, Sakabe J-I, Yoshiki R, Ta bata Y, Kohno K, Tokura Y
  • 雑誌名: Am J Pathol 巻: 176 ページ: 721-732
  • 査読あり
• [雑誌論文] Flaky tail mouse denotes human atopic dermatitis in the steady state and by to pical application with Dermatophagoides pteronyssimus extract (2010)
  • 著者名/発表者名: Moniaga CS, Egawa G, Kawasaki H, Ch ikuma M, Honda T, Tanizaki H, Nakaji ma S, Matsuoka H, Kubo A, Tokura Y, Miyachi Y, Amagai M, Kabashima K
  • 雑誌名: Am J Pathol 巻: 176 ページ: 2385-2393
  • 査読あり
• [雑誌論文] The mandatory role of IL-10-producing and OX40L-expresssing mature Langerhans cells in local UVB-induced immunosuppression (2010)
  • 著者名/発表者名: Yoshiki R, Kabashima K, Sakabe J-I, Su gita K, Bito T, Nakamura M, Malissen B, Tokura Y
  • 雑誌名: J Immunol 巻: 84 ページ: 5670-5677
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ultraviolet light induces Stat3 acti vation in human keratinocytes and fibrob lasts through reactive oxygen species and DNA damage (2010)
  • 著者名/発表者名: Bito T, Sumita N, Masaki T, Shirakawa T, Ueda T, Yoshiki R, Tokura Y, Nishig ori C
  • 雑誌名: Exp Dermatol 巻: 19 ページ: 654-660
  • 査読あり
• [雑誌論文] Activated regulatory Tcells are the major Tcell type emigrating from the skin during a cutaneous immune response in mice (2010)
  • 著者名/発表者名: Tomura M, Honda T, Tanizaki H, Otsuk a A, Egawa G, Tokura Y, Waldmann H, Hori S, Cyster JG, Watanabe T, Miyach i Y, Kanagawa O, Kabashima K
  • 雑誌名: J Clin Invest 巻: 120 ページ: 883-893
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cholinergic urticaria : Studies on the muscarinic cholinergic receptor M3 in the anhidrotic and hypohidrotic skin (2010)
  • 著者名/発表者名: Sawada Y, Nakamura M, Bito T, Fukam achi S, Kabashima R, Sugita K, Hino R, Tokura Y
  • 雑誌名: J Invest Dermatol 巻: 130 ページ: 2683-2686
  • 査読あり
• [雑誌論文] FTY720 regulates bone marrow egress of eosinop hils and modulates late phase skin reacti on in mice (2010)
  • 著者名/発表者名: Sugita K, Kabashima K, Sakabe J-I, Yos hiki R, Tanizaki H, Tokura Y
  • 雑誌名: Am J Pathol 巻: 177 ページ: 1881-1887
  • 査読あり
• [雑誌論文] Extrinsic and intrinsic types o f atopic dermatitis (2010)
  • 著者名/発表者名: Tokura Y
  • 雑誌名: J Dermatol Sci 巻: 58 ページ: 1-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Rosa cea-like demodicosis mimicking cutaneou s lymphoma
  • 著者名/発表者名: Kito Y, Hashizume H, Tokura Y
  • 雑誌名: Acta Derm Venereol 巻: (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Haemodialysis-induced pseudoporphyria successfully treated with glutathione
  • 著者名/発表者名: Kasuya A, Hashizume H, Tokura Y
  • 雑誌名: Eur J Dermatol 巻: (in press)
  • 査読あり
• [学会発表] Th17細胞と皮膚疾患 (2011)
  • 著者名/発表者名: 戸倉新樹
  • 学会等名: 第39回日本臨床免疫学会総会
  • 発表場所: 東京都
  • 年月日: 20110915-17
• [学会発表] Skin barrier impairment is het erogeneous in atopic dermatitis (2011)
  • 著者名/発表者名: Tokura Y
  • 学会等名: The 36th Annual Meeting of the Japanese Socie ty for Investigative Dermatology
  • 発表場所: Kyoto, Japan
  • 年月日: 2011-12-10
• [学会発表] Atopic dermatitis and skin ba rrier in the extrinsic and intrinsic types (2011)
  • 著者名/発表者名: Tokura Y
  • 学会等名: The 37^<th> Annual Meeting of the Taiwane se Dermatological Association
  • 発表場所: Taipei, Taiwan.
  • 年月日: 2011-11-26
• [学会発表] 内因性アトピー性皮膚炎 (2011)
  • 著者名/発表者名: 戸倉新樹
  • 学会等名: 第62回日本皮膚科学会中部支部学術大会
  • 発表場所: 四日市
  • 年月日: 2011-11-20
• [学会発表] 外来性物質に対する皮膚アレルギー反応機構 (2011)
  • 著者名/発表者名: 戸倉新樹
  • 学会等名: 第61回日本アレルギー学会秋季学術大会
  • 発表場所: 東京都
  • 年月日: 2011-11-11
• [学会発表] Extrinsic and intrinsic types o f atopic dermatitis. Ancillary Meeting on Atopic Dermatitis (2011)
  • 著者名/発表者名: Tokura Y
  • 学会等名: 22^<nd> World Congress of Dermatology
  • 発表場所: Seoul, Korea
  • 年月日: 2011-05-24
• [学会発表] Recent concept on the role of cutaneous dendritic cells in UVB-induce d immunosuppression (2011)
  • 著者名/発表者名: Tokura Y
  • 学会等名: 22^<nd> World Congress of Dermatology 2011
  • 発表場所: Seo ul, Korea
  • 年月日: 2011-05-24
• [学会発表] 外因性.内因性という分別はアトピー性皮膚炎に必要か (2011)
  • 著者名/発表者名: 戸倉新樹
  • 学会等名: 第16回アトピー性皮膚炎治療研究会シンポジウム
  • 発表場所: 小倉市
  • 年月日: 2011-02-05
• [学会発表] Extrinsic and intrinsic types of atopic dermatitis (2010)
  • 著者名/発表者名: Tokura Y
  • 学会等名: The 35^<th> Annual Mee ting of Japanese Society for Investigative Dermatology
  • 発表場所: Wakayama Prefectural Cultural Hall, Wakayama
  • 年月日: 2010-12-04
• [図書] Hypersensitivity to mosquito bites and EBV (2011)
  • 著者名/発表者名: Tokura Y
  • 総ページ数: 423-428
  • 出版者: MEDRANG
• [図書] 皮膚科臨床アセット1.アトピー性皮膚炎 (2011)
  • 著者名/発表者名: 戸倉新樹
  • 総ページ数: 130-135
  • 出版者: 中山書店
• [図書] 皮膚疾患最新の治療2011-2012 (2011)
  • 著者名/発表者名: 戸倉新樹
  • 総ページ数: 117
  • 出版者: 南江堂
• [図書] 皮膚科診療カラーアトラス大系 (2011)
  • 著者名/発表者名: 戸倉新樹
  • 総ページ数: 58, 86-88
  • 出版者: 講談社
• [図書] 臨床医必携-全身とかゆみ (2011)
  • 著者名/発表者名: 戸倉新樹
  • 総ページ数: 124-126
  • 出版者: 診断と治療社
• [産業財産権] 皮膚疾患治療薬 (2009)
  • 発明者名: 戸倉新樹・深町晶子
  • 権利者名: 産業医科大学・浜松医科大学
  • 産業財産権番号: 特許、2009-244528
  • 出願年月日: 2009-10-23