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ヒト歯肉から上皮primary cultureを作成し、mouse monoclonal integrin alpha 6 beta 4 (α6β4) antibodyで標識し、α6β4 negative (α6β4 neg)分画とα6β4 positive (α6β4 pos)分画に分離した。CD71 positive (CD71pos) 分画とCD71 negative (CD71neg) に分けた。さらにα6β4 pos CD71neg分画がkeratinocyte stem cell markersでp63とkeratin 19に陽性であった。Stem cell populationすなわちα6β4 pos CD71neg分画は約一割程度であった。Guava® Cell Cycle reagentを用いα6β4 pos CD71neg 分画の細胞周期ではG0/G1が増加した。Transwell system に、歯肉線維芽細胞を含むコラーゲンゲルを置き、DMEM 10% FBSで7日間培養した。 oral keratinocyte stem cells （α6β4 pos CD71neg分画）を播種して、 EpiLife® medium 中で4日間培養した。すなわち培養上皮組織を液面上まで引き上げ空気に曝露し、上皮形成を行った。免疫染色にて基底膜部の幹細胞およびkeratinocytesが層状に観察できた。さらに、表層になるにつれて細胞の成熟が観察された。さらにヒト骨髄幹細胞から再生した骨の上に移植を試みたが、現状では成功に至らなかった。
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