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2012 年度 実績報告書

間質流制御による三次元複合肝組織の血管化

研究課題

研究課題/領域番号 22680037
研究機関慶應義塾大学

研究代表者

須藤 亮  慶應義塾大学, 理工学部, 准教授 (20407141)

研究期間 (年度) 2010-04-01 – 2013-03-31
キーワード生物・生体工学 / マイクロ・ナノデバイス / 細胞・組織
研究概要

本研究では、ティッシュエンジニアリングの重要な課題である「毛細血管を含む三次元複合組織の再生」を実現するために生体外で再生した複数の組織を融合させる新しい研究手法を提案している。具体的には、マイクロ流体デバイスによって細胞外環境の間質流および細胞配置を時間的・空間的に制御した環境下で、多細胞のダイナミクス(細胞接着・遊走・走化性・形態形成)を最適化し、三次元複合肝組織に毛細血管を導入する(血管化)ことを目的とする。さらに、工学を基盤とした複合臓器再生のための新しい構成論的手法として展開するための研究基盤を確立することを目的とした。
本年度は、マイクロ流体デバイスを用いて間質流を制御し、細胞の配置や形態形成を時間的・空間的に制御することで、細胞群が組織化し、血管化するために最適な条件を検討した。具体的には、以下の研究成果を得た。
1.昨年度に改良した新しいデザインのマイクロ流体デバイスを用いて肝細胞と血管内皮細胞の共培養を行い、共培養のプロセスを明らかにした。
2.昨年度までに得られた実験成果から、血管内皮細胞との共培養プロセスを時間的に制御することが肝細胞組織の血管化を行う際に重要であることを見出し、新しく作成したマイクロ流体デバイスで血管内皮細胞および肝細胞の播種時期をコントロールすることで三次元肝組織の血管化が実現しうる知見を得た。
3.マイクロ流体デバイスでの微小培養環境を検討するため、生体内における血管化プロセスの検討を行い、血管密度が重要なパラメーターであることを見出した。
4.肝組織の血管化を行う際に、毛細血管網を安定化させることが重要であるとの考えに至り、間葉系幹細胞と血管内皮細胞の共培養を行うことでマイクロ流体デバイスにおいて毛細血管網を長期間維持する微小培養環境を見出した。

現在までの達成度 (区分)
理由

24年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

24年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (22件)

すべて 2013 2012 その他

すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 6件) 学会発表 (15件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] A three-dimensional microfluidic tumor cell migration assay to screen the effect of anti-migratory drugs and interstitial flow2013

    • 著者名/発表者名
      Johann Kalchman
    • 雑誌名

      Microfluidics and Nanofluidics

      巻: 掲載確定 ページ: 掲載確定

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Reconstruction of hepatic stellate cell-incorporated liver capillary structures in small hepatocyte tri-culture using microporous membranes2013

    • 著者名/発表者名
      Junichi Kasuya
    • 雑誌名

      Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine

      巻: 掲載確定 ページ: 掲載確定

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Steady and pulsatile shear stress induce differenct three-dimensional endothelial networks through pseudopodium formation2013

    • 著者名/発表者名
      Yoshinori Abe
    • 雑誌名

      Journal of Biorheology

      巻: 掲載確定 ページ: 掲載確定

    • 査読あり
  • [雑誌論文] The stabilization effect of mesenchymal stem cells on the formation of microvascular networks in a microfluidic device2013

    • 著者名/発表者名
      Kyoko Yamamoto
    • 雑誌名

      Journal of Biomechanical Science and Engineering

      巻: 掲載確定 ページ: 掲載確定

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Spatio-temporal control of hepatic stellate cell-endothelial cell interactions for reconstruction of liver sinusoids in vitro2012

    • 著者名/発表者名
      Junichi Kasuya
    • 雑誌名

      Tissue Engineering Part A

      巻: 18 ページ: 1045-1056

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Microfluidic assay for simultaneous culture of multiple cell types on surfaces or within hydrogels2012

    • 著者名/発表者名
      Yoojin Shin
    • 雑誌名

      Nature Protocols

      巻: 7 ページ: 1247-1259

    • 査読あり
  • [学会発表] A 3D microfluidic cancer cell migration assay to screen the effect of anti-migratory drugs and interstitial flow

    • 著者名/発表者名
      Johann Kalchman
    • 学会等名
      第51回 日本生体医工学会大会
    • 発表場所
      福岡国際会議場(福岡県)
  • [学会発表] 血管透過性による毛細血管ネットワークの再形成プロセスの評価

    • 著者名/発表者名
      谷村耕平
    • 学会等名
      第35回 日本バイオレオロジー学会年会
    • 発表場所
      朱鷺メッセ 新潟コンベンションセンター(新潟県)
  • [学会発表] 肝細胞との共培養が血管内皮細胞の三次元ネットワーク形成に与える影響

    • 著者名/発表者名
      須藤亮
    • 学会等名
      第11回 日本再生医療学会総会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川県)
  • [学会発表] 背側皮膚窓を用いた三次元移植肝細胞組織の細胞動態観察

    • 著者名/発表者名
      若杉美樹
    • 学会等名
      第11回 日本再生医療学会総会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川県)
  • [学会発表] 血管内皮細胞-間葉系幹細胞共培養系における細胞間相互作用の検討

    • 著者名/発表者名
      山本興子
    • 学会等名
      第11回 日本再生医療学会総会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川県)
  • [学会発表] 小型肝細胞-星細胞-血管内皮細胞共培養モデルにおける肝類洞様構造の再構築と肝細胞機能発現

    • 著者名/発表者名
      須藤亮
    • 学会等名
      第19回 肝細胞研究会
    • 発表場所
      札幌医科大学(北海道)
  • [学会発表] Quantitative analysis of interactions between capillary networks and hepatocyte tissues in a microfluidic platform

    • 著者名/発表者名
      Ryo Sudo
    • 学会等名
      3rd TERMIS World Congress
    • 発表場所
      Vienna (Austria)
  • [学会発表] Construction of functional ex-vivo liver tissues with pericytes-incorporated microvessels using microporous membranes

    • 著者名/発表者名
      Junichi Kasuya
    • 学会等名
      3rd TERMIS World Congress
    • 発表場所
      Vienna (Austria)
  • [学会発表] マウス背側皮膚窓への培養肝細胞組織移植による血管新生観察と組織酸素分圧測定

    • 著者名/発表者名
      若杉美樹
    • 学会等名
      第16回 酸素ダイナミクス研究会
    • 発表場所
      島津製作所東京支社イベントホール(東京都)
  • [学会発表] 血管内皮細胞の3次元ネットワーク形成に及ぼす間質流の影響

    • 著者名/発表者名
      阿部順紀
    • 学会等名
      日本生体医工学会関東支部若手研究者発表会
    • 発表場所
      東京都市大学世田谷キャンパス(東京都)
  • [学会発表] Three-dimensional liver cancer cell migration assay under interstitial flow in a microfluidic system

    • 著者名/発表者名
      Ryo Sudo
    • 学会等名
      1st Annual IEEE EMBS Micro and Nanotechnology in Medicine Conference
    • 発表場所
      Ka’anapali (USA)
  • [学会発表] 生体工学的手法による微小血管構築制御

    • 著者名/発表者名
      須藤亮
    • 学会等名
      日本機械学会 第25回 バイオエンジニアリング講演会
    • 発表場所
      産業技術総合研究所つくばセンター(茨城県)
  • [学会発表] マウス背側皮膚窓による培養小型肝細胞組織移植に伴う血管新生の観察

    • 著者名/発表者名
      若杉美樹
    • 学会等名
      日本機械学会 第25回 バイオエンジニアリング講演会
    • 発表場所
      産業技術総合研究所つくばセンター(茨城県)
  • [学会発表] 血管内皮細胞と間葉系幹細胞の相互作用による毛細血管安定化の検討

    • 著者名/発表者名
      山本興子
    • 学会等名
      日本機械学会 第25回 バイオエンジニアリング講演会
    • 発表場所
      産業技術総合研究所つくばセンター(茨城県)
  • [学会発表] 安定化毛細血管の再生における血管内皮細胞と間葉系幹細胞の相互作用

    • 著者名/発表者名
      山本興子
    • 学会等名
      第12回 日本再生医療学会総会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川県)
  • [備考] 慶應義塾大学 理工学部 須藤研究室 ホームページ

    • URL

      http://www.sudo.sd.keio.ac.jp/

URL: 

公開日: 2014-07-24  

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