DNA免疫法を用いた霊長類用検出抗体の作成法の確立

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22700455
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 実験動物学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 東岸 任弘 大阪大学, 微生物病研究所, 助教 (20379093)
• 連携研究者: 堀井 俊宏 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (80142305) ; 保富 康宏 独立行政法人医薬基盤研究所, 霊長類医科学研究センター, センター長 (90281724) ; 立花 太郎 大阪市立大学, 工学(系)研究科(研究院), 准教授 (80311752) ; 中村 昇太 大阪大学, 微生物病研究所, 助教 (90432434)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• キーワード: リスザル / モデル動物 / 免疫関連遺伝子 / イムノグロブリン / Fcγレセプター / 検出抗体 / 次世代シークエンサー / マラリア

研究概要

リスザル(Saimiri sciureus)はマラリアワクチンの開発にとって最も価値のある実験動物にもかかわらず、そのIgGについては解析が行われていない。抗体を介した免疫応答に抗体依存的細胞障害(ADCC)と呼ばれるメカニズムが知られており、感染マラリア原虫の排除にとって重要である。このメカニズムにおいて、ヒトでは抗原を認識したIgG1あるいはIgG3がFcレセプターの一つあるFcγRIIIaと結合することが知られている。そこで我々はリスザルのFcγRIIIaに興味を持ち、この遺伝子を同定した。これまでに、ヒトのFcγRIIIaの 176 番目のフェニルアラニンがバリンに置換した変異ではIgG1、IgG3のみならず、IgG4にも結合することが報告されている。我々はリスザルのFcγRIIIaにおいて、相当する残基がバリンであることを見出した。このことはIgGとFcレセプターとの関係、ADCCのメカニズムの進化を知る上で非常に興味深い。最後に我々は高感度で特異性の高い抗リスザルIgGモノクローナル抗体を開発し、このモノクローナル抗体がウェスタンブロッティングおよびELISAで有用であることを示した。

研究成果

• [雑誌論文] Endemic Burkitt lymphoma is associated with strength and diversity of Plasmodium falciparummalaria stage-specific antigen antibody response (2013)
  • 著者名/発表者名: Aka P, Vila MC, Jariwala A, Nkrumah F, Emmanuel B, Yagi M, Palacpac NM, Periago MV, Neequaye J, Kiruthu C, Tougan T, Levine PH, Biggar RJ, Pfeiffer RM, Bhatia K, Horii T, Bethony JM, Mbulaiteye SM
  • 雑誌名: Blood
  • DOI: doi:10.1182/blood-2012-12-475665
  • 査読あり
• [雑誌論文] Within-population genetic diversity of Plasmodium falciparum vaccine candidate antigens reveals geographic distance from a Central sub-Saharan African origin (2013)
  • 著者名/発表者名: Tanabe K, Mita T, Palacpac NM, Arisue N, Tougan T, Kawai S, Jombart T, Kobayashi F, Horii T
  • 雑誌名: Vaccine 巻: 31(9) ページ: 1334-9
  • DOI: doi:10.1016/j.vaccine.2012.12.039
  • 査読あり
• [雑誌論文] TLR9 adjuvants enhance immunogenicity and protective efficacy of the SE36/AHG malaria vaccine in nonhuman primate models (2013)
  • 著者名/発表者名: Tougan T, Aoshi T, Coban C, Katakai Y, Kai C, Yasutomi Y, Ishii KJ, Horii T
  • 雑誌名: Hum Vaccin Immunother 巻: 9(2) ページ: 283-290
  • DOI: doi:10.4161/hv.22950
  • 査読あり
• [雑誌論文] Plasmodium cynomolgi genome sequences provide insight into Plasmodium vivax and the monkey malaria clade (2012)
  • 著者名/発表者名: Tachibana SI, Sullivan SA, Kawai S, Nakamura S, Kim HR, Goto N, Arisue N, Palacpac NM, Honma H, Yagi M, Tougan T, Katakai Y, Kaneko O, Mita T, Kita K, Yasutomi Y, Sutton PL, Shakhbatyan R, Horii T, Yasunaga T, Barnwell JW, Escalante AA, Ca
  • 雑誌名: Nature Genetics 巻: 44(9) ページ: 1051-5
  • DOI: doi:10.1038/ng.2375
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transcutaneous immunization using a dissolving microneedle array protects against tetanus, diphtheria, malaria, and influenza (2012)
  • 著者名/発表者名: Matsuo K, Hirobe S, Yokota Y, Ayabe Y, Seto M, Quan YS, Kamiyama F, Tougan T, Horii T, Mukai Y, Okada N, Nakagawa S
  • 雑誌名: J Control Release 巻: 160(3) ページ: 495-501
  • DOI: doi:10.1016/j.jconrel.2012.04.001
  • 査読あり
• [雑誌論文] Geographic differentiation of polymorphism in the Plasmodium falciparum malaria vaccine candidate gene SERA5 (2012)
  • 著者名/発表者名: Tanabe K, Arisue N, Palacpac NM, Yagi M, Tougan T, Honma H, Ferreira MU, Farnert A, Bjorkman A, Kaneko A, Nakamura M, Hirayama K, Mita T, Horii T
  • 雑誌名: Vaccine 巻: 30(9) ページ: 1583-93
  • DOI: doi:10.1016/j.vaccine.2011.12.124
  • 査読あり
• [雑誌論文] Antibodies reactive to Plasmodium falciparum serine repeat antigen in children with burkitt lymphoma from ghana (2012)
  • 著者名/発表者名: Guech-Ongey M, Yagi M, Palacpac NM, Emmanuel B, Talisuna AO, Bhatia K, Cristina Stefan D, Biggar RJ, Nkrumah F, Neequaye J, Tougan T, Horii T, Mbulaiteye SM
  • 雑誌名: Int J Cancer 巻: 130(8) ページ: 1908-14
  • DOI: doi:10.1002/ijc.26203
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Mek1 phosphorylation cascade plays a role in meiotic recombination of Schizosaccharomyces pombe (2010)
  • 著者名/発表者名: Tougan T, Kasama T, Ohtaka A, Okuzaki D, Saito TT, Russell P, Nojima H
  • 雑誌名: Cell Cycle 巻: 9(23) ページ: 4688-4702
  • DOI: doi:10.4161/cc.9.23.14050
  • 査読あり
• [雑誌論文] GenopalTM: a novel hollow fiber array for focused microarray analysis (2010)
  • 著者名/発表者名: Okuzaki D, Fukushima T, Tougan T, Ishii T, Kobayashi S, Akita T, Nojima H
  • 雑誌名: DNA Research 巻: 17(6) ページ: 369-379
  • DOI: doi:10.1093/dnares/dsq025
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evidences of protection against blood-stage infection of Plasmodium falciparum by the novel protein vaccine SE36 (2010)
  • 著者名/発表者名: Horii T, Shirai H, Jie L, Ishii KJ, Palacpac NQ, Tougan T, Hato M, Ohta N, Bobogare A, Arakaki N, Matsumoto Y, Namazue J, Ishikawa T, Ueda S, Takahashi M
  • 雑誌名: Parasitology Int 巻: 59(3) ページ: 380-386
  • DOI: doi:10.1016/j.parint.2010.05.002
  • 査読あり
• [雑誌論文] Plasmacytoid dendritic cells delineate immunogenicity of influenza vaccine subtypes (2010)
  • 著者名/発表者名: Koyama S, Aoshi T, Tanimoto T, Kumagai Y, Kobiyama K, Tougan T, Sakurai K, Coban C, Horii T, Akira S, Ishii KJ
  • 雑誌名: Sci Transl Med 巻: 2(25) ページ: 25ra24
  • DOI: doi:10.1126/scitranslmed.3000759
  • 査読あり
• [学会発表] 抗 SE36 抗体の誘導とマラリア抵抗性に関与する遺伝的バックグラウンドの研究/Analysis of African HLA genes in a population that participated in the Phase 1b trial of BK-SE36 (2013)
  • 著者名/発表者名: 東岸任弘、Nirianne Q. Palacpac、八木正典、中村昇太、後藤和義、Thomas G. Egwang、堀井俊宏
  • 学会等名: 第82回日本寄生虫学会大会
  • 発表場所: 東京医科歯科大学湯島キャンパス(東京)
  • 年月日: 20130329-31
• [学会発表] 新規アジュバントを添加した次世代SE36 マラリアワクチンの開発:旅行者用ワクチンへのアプローチ (2013)
  • 著者名/発表者名: 東岸任弘、青枝大貴、Cevayir Coban、片貝祐子、甲斐知恵子、保富康宏、石井健、堀井俊宏
  • 学会等名: 日本薬学会第133回年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川)
  • 年月日: 20130327-30
• [学会発表] 抗 SE36 抗体の誘導とマラリア抵抗性に関与する遺伝的バックグラウンドの研究 (2013)
  • 著者名/発表者名: 東岸任弘、Nirianne Q. Palacpac、八木正典、中村昇太、後藤和義、Thomas G. Egwang、堀井俊宏
  • 学会等名: 感染症若手フォーラム 2013
  • 発表場所: 北広島クラッセホテル(北海道)
  • 年月日: 20130228-0302
• [学会発表] リスザルは単一の IgG を持ち、サブクラスを持たない (2012)
  • 著者名/発表者名: 東岸任弘、中村昇太、朴辰幸、片貝祐子、保富康宏、立花太郎、堀井俊宏
  • 学会等名: 日本実験動物科学・技術 九州 2012
  • 発表場所: ビーコンプラザ(大分)
  • 年月日: 20120524-26
• [学会発表] ホテル阪急エキスポパーク(大阪) (2012)
  • 著者名/発表者名: 東岸任弘、中村昇太、朴辰幸、片貝祐子、保富康宏、立花太郎、堀井俊宏
  • 学会等名: NGS 現場の会 第2回研究会
  • 発表場所: ホテル阪急エキスポパーク(大阪)
  • 年月日: 20120523-25
• [学会発表] Squirrel monkey has a single IgG and no IgG subclasses (2012)
  • 著者名/発表者名: Takahiro Tougan, Shota Nakamura, Chin-Heng Paku, Yuko Katakai, Yasuhiro Yasutomi, Taro Tachibana and Toshihiro Horii
  • 学会等名: 5th International CVRDC-RIMD Joint Symposium
  • 発表場所: SEOGWIPO KAL HOTEL(韓国・済州島)
  • 年月日: 20120511-12
• [学会発表] ・リスザルは単一の IgG を持ち (2012)
  • 著者名/発表者名: 東岸任弘、中村昇太、朴辰幸、片貝祐子、保富康宏、立花太郎、堀井俊宏
  • 学会等名: 日本分子生物学会 第12回 春季シンポジウム(
  • 発表場所: 石和温泉・慶山(山梨)
  • 年月日: 20120425-26
• [学会発表] リスザルは 1 種類の IgG しか持たず (2012)
  • 著者名/発表者名: 東岸任弘、中村昇太、朴辰幸、片貝祐子、保富康宏、立花太郎、堀井俊宏
  • 学会等名: 感染症若手フォーラム
  • 発表場所: 海の見えるホテル(長崎)
  • 年月日: 20120202-04
• [学会発表] 新規アジュバント添加による次世代 SE36 マラリアワクチンの開発と実用化:旅行者用ワクチンへのアプローチ (2012)
  • 著者名/発表者名: 東岸任弘、青枝大貴、八木正典、有末伸子、片貝祐子、保富康宏、甲斐知恵子、石井健、堀井俊宏
  • 学会等名: 日本実験動物技術者協会北陸支部 本部共催講習会第331回
  • 発表場所: 金沢大学学際科学実験センター(石川)
  • 年月日: 2012-03-10
• [学会発表] Squirrel monkey has a single IgG and no IgG subclasses (2011)
  • 著者名/発表者名: Takahiro Tougan, Shota Nakamura, Chin-Heng Paku, Yuko Katakai, Yasuhiro Yasutomi, Taro Tachibana and Toshihiro Horii
  • 学会等名: 第34回分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川)
  • 年月日: 20111213-16
• [学会発表] Development of next generation SE36 malaria vaccine formulated with a novel adjuvant: approach to travelers' vaccine (2011)
  • 著者名/発表者名: Takahiro Tougan, Taiki Aoshi, Masanori Yagi, Cevayir Coban, Nobuko Arisue, Yuko Katakai, Yasuhiro Yasutomi, Chieko Kai, Ken J. Ishii and Toshihiro Horii
  • 学会等名: Nagasaki Symposium on Malaria Biology 2011 (II)
  • 発表場所: 長崎大学(長崎)
  • 年月日: 20111116-17
• [学会発表] Development of next generation SE36 malaria vaccine formulated with a novel adjuvant: approach to travelers' vaccine (2011)
  • 著者名/発表者名: Takahiro Tougan, Taiki Aoshi, Masanori Yagi, Cevayir Coban, Nobuko Arisue, Yuko Katakai, Yasuhiro Yasutomi, Chieko Kai, Ken J. Ishii and Toshihiro Horii
  • 学会等名: 17th Japanese-German Cooperative Symposium on Protozoan Diseases
  • 発表場所: 奈良女子大学(奈良)
  • 年月日: 20110912-16
• [学会発表] Development of next generation SE36 malaria vaccine formulated with a novel adjuvant: approach to travelers' vaccine. (2011)
  • 著者名/発表者名: Takahiro Tougan, Taiki Aoshi, Masanori Yagi, Cevayir Coban, Nobuko Arisue, Yuko Katakai, Yasuhiro Yasutomi, Chieko Kai, Ken J. Ishii and Toshihiro Horii
  • 学会等名: IUMS (International Union of Microbiological Societies) 2011 Congress
  • 発表場所: Sapporo Convention Center, Sapporo Business Innovation Center (北海道)
  • 年月日: 20110906-10
• [学会発表] 新規アジュバント添加による次世代 SE36 マラリアワクチンの開発と実用化:旅行者用ワクチンへのアプローチ /Development and application of next generation SE36 malaria vaccine formulated with a novel adjuvant: approach to travelers' vaccine (2011)
  • 著者名/発表者名: 東岸任弘、青枝大貴、八木正典、有末伸子、片貝祐子、保富康宏、甲斐知恵子、石井健、堀井俊宏
  • 学会等名: 第7回霊長類医科学フォーラム
  • 発表場所: 研究交流センター 国際会議場(茨城)
  • 年月日: 2011-11-18
• [学会発表] 新規アジュバント添加による次世代 SE36 マラリアワクチンの開発と実用化:旅行者用ワクチンへのアプローチ (2010)
  • 著者名/発表者名: 東岸任弘・石井健・堀井俊宏
  • 学会等名: 第14回日本ワクチン学会学術集会
  • 発表場所: 九段会館(東京)
  • 年月日: 20101211-12
• [学会発表] 新規アジュバント添加による次世代SE36 マラリアワクチンの開発と実用化:旅行者用ワクチンへのアプローチ/Development and application of next generation SE36 malaria vaccine formulated with a novel adjuvant: approach to travelers' vaccine. (2010)
  • 著者名/発表者名: 東岸任弘・青枝大貴・八木正典・有末伸子・片貝祐子・保富康宏・甲斐知恵子・石井健・堀井俊宏
  • 学会等名: 第79回日本寄生虫学会大会
  • 発表場所: 新規アジュバント添加による次世代SE36 マラリアワクチンの開発と実用化:旅行者用ワクチンへのアプローチ/Development and application of next generation SE36 malaria vaccine formulated with a novel adjuvant: approach to travelers' vaccine.
  • 年月日: 20100520-21
• [図書] Vaccine (2011)
  • 著者名/発表者名: Palacpac NM, Arisue N, Tougan T, Ishii KJ, Horii T
  • 総ページ数: 5837-45
• [図書] Methods Mol Biol (2011)
  • 著者名/発表者名: Nojima H, Tougan T
  • 総ページ数: 15-35
• [図書] 綜合臨牀 (2011)
  • 著者名/発表者名: 東岸任弘、堀井俊宏
  • 総ページ数: 53-57
• [図書] Pharma Medica (2011)
  • 著者名/発表者名: 東岸任弘、田邊和裄、堀井俊宏
  • 総ページ数: 53-57
• [図書] 臨床粘膜免疫学 (2010)
  • 著者名/発表者名: 東岸任弘、堀井俊宏
  • 総ページ数: 489-497
  • 出版者: 株式会社シナジー
• [図書] 臨床検査 (2010)
  • 著者名/発表者名: 東岸任弘、堀井俊宏
  • 総ページ数: 1413-1421
• [図書] 東次世代ワクチンの産業応用技術 (2010)
  • 著者名/発表者名: 東岸任弘、石井健、堀井俊宏
  • 総ページ数: 175-186
• [図書] 新薬展望 (2010)
  • 著者名/発表者名: 東岸任弘、堀井俊宏
  • 総ページ数: 139(349)-145(355)
• [図書] DDS(DDS 学会誌) (2010)
  • 著者名/発表者名: 東岸任弘、石井 健、堀井俊宏
  • 総ページ数: 37-45
• [備考] 大阪大学・微生物病研究所・分子原虫学分野ホームページ
  • URL: http://www.biken.osaka-u.ac.jp/lab/protozool/index.html