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トレニア・フルニエリ(Torenia fournieri)とバイロニー(Torenia baillonii)の雑種の減数分裂で出現するフルニエリの一価染色体の構造と起源を明らかにするため、以下の3項目の研究をおこなった。
1.トレニアSSRマーカーの開発と連鎖地図の作製
昨年度に作製したSSRマーカーに加えてさらにマーカー開発を進めた。これらマーカーの一部と、フルニエリとT. violaceaのF2集団を用いて多型解析をおこない、部分的な連鎖地図を構築した。現在、残り全てのマーカーを用いて多型解析を進めている。
2.一価染色体由来ペィンティングプローブの作製
一価染色体の蛍光マイクロダイセクションを目的に、懸濁した減数分裂細胞をフィルムコートスライドへ滴下したが、良好な染色体標本は作製できなかった。一方、押しつぶし法をフィルムコートスライド上で行なったところ、良好な染色体標本が作製できた。今後、蛍光マイクロダイセクションを試みる。
3.野生種の収集と、BAC-FISHによる一価染色体由来DNA配列の検出
タイなど東南アジア諸国から、多数のトレニア近縁野生種を収集した。FISHで染色体数と動原体構造を明らかにし、分子系統樹を作製した。また胚珠培養から、多数の雑種を育成した。一方、末端配列を持つフルニエリ由来のFosmidクローンをライブラリーから選抜し、減数分裂第一分裂中期細胞へのFISHを試みたが、いずれも一価染色体由来のクローンではなかった。引き続き、一価染色体由来のクローンを選抜していく。
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