ユニークな基質特異性を持つグリコシダーゼの機能解明から有用糖鎖合成

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22780095
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 応用生物化学
• 研究機関: 石川県立大学
• 研究代表者: 本多 裕司 石川県立大学, 生物資源環境学部, 准教授 (40399382)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• キーワード: エキソβ-D-グルコサミニダーゼ

研究概要

Photobacterium profundum SS9から得られた GH9に属する PBPRA0520蛋白質が、アノマー反転型のエキソβ-D-グルコサミニダーゼである事を明らかにした。本酵素の糖鎖合成酵素化に最適なアミノ酸残基を探索するために、D139に対してsaturation mutagenesis法と部位特異的変異導入法を導入し、19種の変異型酵素(D139X)を得た。これらの変異体の糖鎖合成能について調べてみると、D139E,D139A,およびD139Sが良好な糖鎖合成能を示す事が判明した。

研究成果

• [雑誌論文] Heterogonous expression and characterization of a plant class IV chitinase from the pitcher of the carnivorous plant Nepenthes alata (2012)
  • 著者名/発表者名: Kana Ishisaki, Yuji Honda, Hajime Taniguchi, Naoya Hatano, and Tatsuro Hamada
  • 雑誌名: Glycobiology 巻: Vol.22 ページ: 345-351
  • 査読あり
• [雑誌論文] Elucidation of exo-β-D-glucosaminidase activity of a family 9 glycoside hydrolase (PBPRA0520) from Photobacterium profundum SS9 (2011)
  • 著者名/発表者名: Yuji Honda, Nozomi Shimaya, Kana Ishisaki, Mitsuru Ebihara, and Hajime Taniguchi
  • 雑誌名: Glycobiology 巻: Vol.21 ページ: 503-511
  • 査読あり
• [学会発表] GH ファミリー9 に属するエキソβ-D-グルコサミニダーゼの糖鎖合成酵素化 (2013)
  • 著者名/発表者名: 本多裕司
  • 学会等名: 日本農芸化学会2013年度大会
  • 発表場所: 宮城県
  • 年月日: 20130324-28
• [学会発表] Photobacterium profundum SS9由来エキソβ-D-グルコサミニダーゼの糖鎖合成酵素化 (2012)
  • 著者名/発表者名: 新井祥子(本多裕司)
  • 学会等名: 日本応用糖質科学会平成24年度大会
  • 発表場所: 東京都
  • 年月日: 20120919-21
• [学会発表] Reaction mechanism of an inverting exo-β-D-glucosaminidase from Photobacterium profundum SS9 (2012)
  • 著者名/発表者名: Yuji Honda
  • 学会等名: the 12th Japan-China-Korea Joint Symposium on Enzyme Engineering
  • 発表場所: the 12th Japan-China-Korea Joint Symposium on Enzyme Engineering
  • 年月日: 20120528-31
• [学会発表] Photobacteriumprofundum SS9 由来エキソ型 β-D-グルコサミニダーゼの変異型酵素の機能解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 新井祥子 (本多裕司)
  • 学会等名: 2011 年度日本農芸化学会関西・中部支部合同大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011-10-02
• [学会発表] 食虫植物ウツボカズラ消化液キチン質分解酵素の機能解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 石崎佳奈(本多裕司)
  • 学会等名: 2011年度日本農芸化学会関西・中部支部合同大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011-10-02
• [学会発表] Yuji HONDA (2011)
  • 著者名/発表者名: Yuji HONDA
  • 学会等名: 16th European Carbohydrate Symposium
  • 発表場所: Sorrento, Italy
  • 年月日: 2011-07-04
• [学会発表] Photobacterium profundum SS9 由来 GH9 酵素の機能解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 本多裕司
  • 学会等名: 日本農芸化学会関西支部大会
  • 発表場所: 奈良
  • 年月日: 2010-10-03