| 研究概要 |
本研究では、神経成長因子 (Nerve growth factor, NGF) とその受容体TrkAを介した神経分化シグナル伝達の制御機構の解明と、それを制御しうる低分子化合物の探索を目的としている。これまでに、アラキドン酸代謝産物のひとつである15d-PGJ2がNGFによる神経細胞分化誘導を促進するということが明らかになっていることから、本年度は、15d-PGJ2の作用機構の解明するために、ラット副腎髄質褐色細胞腫であるPC12細胞をNGF依存的な神経分化のモデルとして検討を行った。
前年度までに、15d-PGJ2による神経細胞の分化促進には、細胞内のカルシウム濃度の上昇が関与している可能性を見出した。そこで15d-PGJ2によるカルシウム濃度上昇に関与するカルシウムチャネルについて検討を行った結果、TRPV1が関与している可能性が示唆された。実際にTRPV1のアゴニストであるカプサイシンにも分化促進活性が認められた。また、TRPV1発現ベクターを導入した細胞では、15d-PGJ2による分化促進が増強されること、またTRPV1のsiRNAによる発現抑制により、分化が抑制されることも見出した。さらに、TRPV1の活性化には、15d-PGJ2の親電子性が重要であることから、TRPV1に15d-PGJ2が直接修飾する可能性が示唆されたため、biotin標識した15d-PGJ2を調製し、TRPV1との相互作用を検討したところ、細胞内において15d-PGJ2がTRPV1に結合することが明らかとなった。
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