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2011 年度 研究成果報告書

効率的な遺伝子発現抑制技術を利用した担子菌類の遺伝子解析手法の確立

研究課題

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研究課題/領域番号 22780149
研究種目

若手研究(B)

配分区分補助金
研究分野 森林科学
研究機関公益財団法人岩手生物工学研究センター (2011)
(財)岩手生物工学研究センター (2010)

研究代表者

坂本 裕一  公益財団法人岩手生物工学研究センター, 生物資源研究部, 主任研究員 (80390889)

研究期間 (年度) 2010 – 2011
キーワード森林生産 / 育種
研究概要

食用担子菌類(きのこ)において、効率的な遺伝子破壊技術を確立する目的で、遺伝子破壊ベクターの構築、及び耐性マーカー遺伝子回収技術開発を試みた。シイタケにおいて、DelsGate法により、効率的に遺伝子破壊ベクターを構築する手法を開発した。更にそのベクターにloxP配列を挿入することに成功した。現在のところ、シイタケにおいて、得られたベクターによる破壊株はまだ得られていないことから、条件検討が必要である。また、シイタケにおいて、一核菌糸体において子実体形成を負に制御していると考えられるpcc1遺伝子、及び非相同組み換えに関わるKu80遺伝子のクローニングに成功した。今後これらの破壊株を作出することで、一核菌糸体で子実体を発生し、かつ遺伝子組換え効率の高い菌株が得られると期待できる。また、シイタケにおいては、遺伝子組換えに時間がかかることから、条件検討を効率化するために、ウシグソヒトヨタケの系を利用することとした。そこで、ウシグソヒトヨタケの遺伝子破壊用カセットに、loxP配列を挿入した。今後はまず、ウシグソヒトヨタケにおいて、マーカー回収技術を確立し、その後シイタケにおける破壊系を確立することを予定している。

  • 研究成果

    (16件)

すべて 2012 2011 2010

すべて 雑誌論文 (7件) (うち査読あり 7件) 学会発表 (6件) 図書 (1件) 産業財産権 (2件)

  • [雑誌論文] Characterization of beta-N-acetylhexosaminidase(LeHex20A), a member of glycoside hydrolase family 20, from Lentinula edodes(shiitake mushroom)2012

    • 著者名/発表者名
      Konno N., Takahashi H., Nakajima M., Takeda T., Sakamoto Y.
    • 雑誌名

      AMB express

      巻: 2 ページ: 29

    • DOI

      DOI:10.1186/2191-0855-2-29

    • 査読あり
  • [雑誌論文] An endo-β-1, 6-glucanase involved in Lentinula edodes fruiting body autolysis2011

    • 著者名/発表者名
      Naotake Konno and Yuichi Sakamoto
    • 雑誌名

      Applied Microbiology and Biotechnology

      巻: 91(5) ページ: 1365-1373

    • DOI

      DOI:10.1007/s00253-011-3295-2

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Endo-β-1, 3-glucanase, GLU1, from Lentinula edodes fruiting body belongs to a new glycoside hydrolase family2011

    • 著者名/発表者名
      Sakamoto Y., Nakade K., Konno N.
    • 雑誌名

      Applied and Environmental Microbiology

      巻: 77(23) ページ: 8350-8354

    • DOI

      DOI:10.1128/AEM.05581-11

    • 査読あり
  • [雑誌論文] シイタケ収穫後の子実体老化に関与する酵素の研究2011

    • 著者名/発表者名
      坂本裕一
    • 雑誌名

      日本きのこ学会誌

      巻: 19(2) ページ: 73-78

    • URL

      http://ci.nii.ac.jp/naid/110008711281

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Gene silencing of the Lentinula edodes lcc1 gene by expression of a homologous inverted repeat sequence2011

    • 著者名/発表者名
      Nakade K., Watanabe H., Sakamoto Y., Sato T.
    • 雑誌名

      Microbiological Research

      巻: 166 ページ: 484-493

    • DOI

      DOI:10.1016/j.micres.2010.09.004

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Characterization of an extracellular laccase, PbLac1, purified from Polyporus brumalis2010

    • 著者名/発表者名
      Nakade K., Nakagawa Y., Yano A., Sato T., Sakamoto Y.
    • 雑誌名

      Fungal Biology

      巻: 114 ページ: 609-618

    • DOI

      DOI:10.1016/j.funbio.2010.05.002

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Protein expression during Flammulina velutipes fruiting body formation2010

    • 著者名/発表者名
      Yuichi Sakamoto
    • 雑誌名

      Mycoscience

      巻: 51 ページ: 163-169

    • DOI

      DOI:10.1007/s10267-010-0032-0

    • 査読あり
  • [学会発表] 環境刺激に応答するきのこの子実体発生2012

    • 著者名/発表者名
      坂本裕一
    • 学会等名
      静電気学会バイオプロセス・プラズマ研究会
    • 発表場所
      岩手大学
    • 年月日
      20120000
  • [学会発表] Transcriptome analysis of the autolysis after harvesting of the Lentinula edodes fruiting body2011

    • 著者名/発表者名
      Yuichi Sakamoto
    • 学会等名
      Asian Mycological Congress
    • 発表場所
      韓国、仁川
    • 年月日
      20110000
  • [学会発表] 分泌型ラッカーゼ(Lcc1) RNAi抑制株におけるシイタケ細胞壁構造の変化2011

    • 著者名/発表者名
      中出啓子、坂本裕一
    • 学会等名
      糸状菌分子生物学コンファレンス
    • 発表場所
      東京大学
    • 年月日
      20110000
  • [学会発表] Characterization of biological function of laccases in Lentinula edodes2010

    • 著者名/発表者名
      Sakamoto, Y., Nakade, K
    • 学会等名
      International Mycological Congress 9th
    • 年月日
      20100000
  • [学会発表] シイタケにおける形態形成と細胞壁分解酵素の発現挙動2010

    • 著者名/発表者名
      坂本裕一
    • 学会等名
      日本きのこ学会2010年度大会
    • 発表場所
      東京大学
    • 年月日
      20100000
  • [学会発表] Enzymes involved in fruiting body senescence in L. edodes2010

    • 著者名/発表者名
      Sakamoto, Y., Nakade, K., Konno, N.
    • 学会等名
      The 6th Meeting of East Asia for Mushroom Science
    • 発表場所
      韓国、慶州
    • 年月日
      20100000
  • [図書] Food Quality2012

    • 著者名/発表者名
      Yuichi Sakamoto, Keiko Nakade, Naotake Konno, Toshitsugu Sato
    • 出版者
      Intech
  • [産業財産権] β-N-アセチルヘキソサミニダーゼ2012

    • 発明者名
      金野尚武、坂本裕一
    • 権利者名
      岩手県
    • 産業財産権番号
      特願、2012-009380
    • 出願年月日
      2012-02-14
  • [産業財産権] L-DOPAを蓄積する植物細胞及びその利用2011

    • 発明者名
      中塚貴司、高橋秀行、山田恵理、坂本裕一、関口拓史、佐々木伸大、小関良宏、西原昌宏
    • 権利者名
      岩手県
    • 産業財産権番号
      特開、2012-55208
    • 出願年月日
      2011-03-22

URL: 

公開日: 2013-07-31  

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