ヒト小腸で感染、増殖し、ヒトに急性胃腸炎を引き起こすノロウイルス、サポウイルスは、いまだ培養細胞での増殖が出来ず、機能的受容体も同定されていない。これらのウイルスの感染メカニズムの解明には、ウイルス増殖系の確立が必須である。最近の研究により、従来ノロウイルスの受容体候補とされた糖鎖はウイルスの結合因子としては重要であるものの、糖鎖発現細胞がウイルス増殖にはつながらないことが明らかとなり、機能的受容体ではない可能性が強くなってきた。本研究では昆虫細胞もしくは哺乳動物細胞で発現させたノロウイルス、サポウイルスのウイルス様中空粒子(virus-like particle : VLP)をプローブとして、組換えレトロウイルスの感染によって、ノロウイルス、サポウイルスの増殖部位とされるヒト小腸cDNAライブラリーを、マウス由来浮遊細胞に発現させ、ノロウイルス、サポウイルス結合細胞のスクリーニングを行い、ノロウイルス、サポウイルスVLPに結合した細胞から単離したゲノムを抽出し、ヒト由来遺伝子の塩基配列の解析を行った。 また、培養細胞での増殖系が報告されているマウスノロウイルスの各種培養細胞での増殖能を比較検証し、マウスノロウイルスが増殖可能な細胞、増殖できない細胞を見いだした。さらに、マウスノロウイルスが増殖可能な培養細胞由来のcDNAライブラリーを構築した。今後、マウスノロウイルスが増殖できない細胞にこのcDNAライブラリーを発現させ、ウイルス感受性となった細胞から、機能的受容体候補因子の遺伝子クローニングを試みる。
|