| 研究課題/領域番号 |
22790361
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| 研究機関 | 聖マリアンナ医科大学 |
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研究代表者 |
佐藤 華子 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助教 (60438132)
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| キーワード | 神経内分泌 / 悪性腫瘍 / 転写因子 / 細胞接着因子 |
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| 研究概要 |
前年度までの研究により神経内分泌細胞特異的bHLH型転写因子NeuroDによりNeural cell adhesion molecule 1(NCAM-1)およびlnsulin-like growth factor binding protein-2(IGFBP-2)発現誘導されることが判明した。そこで本年度はNCAM-1およびIGFBP-2が細胞増殖および宿主に及ぼす影響を検討するととした。
ドキシサイクリンにより発現のON-OFFが可能なレトロウィルスベクター系を用い、ヒトNCAM-1およびヒトIGFBP-2発現ベクターを作成した。これを肺癌細胞株に導入することにより、NCAM-1およびIGFBP-2が細胞増殖に及ぼす影響、形態変化に及ぼす影響について、病理細胞学的に解析した。その結果、NCAM1発現およびIGFBP-2発現の誘導により肺癌細胞の増殖は約10%-20%抑制された。
また、ドキシサイクリンにより発現のON-OFFが可能なレトロウィルスベクター系を用い、マウスNCAM-1およびマウスIGFBP-2発現ベクターを作成し、これをマウス肺癌細胞株に導入することにより、安定発現株を作成した。これをヌードマウスに接種し、癌細胞に発現するNCAM-1およびIGFBP-2が担癌宿主に及ぼす影響(浸潤性、転移性の変化)、形態変化に及ぼす影響を、病理組織学的に解析することとした。具体的には、上記遺伝子導入マウス肺癌細胞を経尾静脈的に5x10^6個/マウスで移植し、4週後に肺に形成された腫瘍について、病理組織学的に解析した。その結果、形成された腫瘍数はNCAM-1導入株>>IGFBP-2導入株,空ベクター導入株であり、NCAM-1の発現により腫瘍形成能が亢進した。また各遺伝子導入株間に有意な形態学的差異は認められなかった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
ヒトおよびマウスNCAM-1発現ウィルスベクターの作成、およびそれらがドキシサイクリン下に安定発現誘導されるヒト肺癌細胞およびマウス肺癌細胞の作成に成功し、それらを用いた動物実験を行うことができたため。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後は、本年度に作成できた動物モデルを用い、接種する癌細胞数を変化させる、また経過観察する期間を変化させることにより、導入遺伝子が浸潤性や転移性に与える影響について、更に詳細に検討していきたい。
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