HIV潜伏感染モデル動物の構築と潜伏化メカニズムの解明

2011 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 22790430
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 蝦名 博貴 京都大学, ウイルス研究所, 助教 (60541951)
• キーワード: 潜伏感染 / HIV / インテグレーション / ヒト化マウス / エピジェネティクス

研究概要

Human immunodeficiency virus (HIV)を感染者体内から完全除去する事は、現在の薬剤療法では不可能である。HIVの潜伏感染がその原因であると考えられているが、その潜伏化機構はいまだに明らかになっていない。そこで本研究では、HIV潜伏感染決定メカニズムの解明を目的とした。
H22年度は、生体内におけるHIVの潜伏感染を再現するために、LTRプロモーターよりウイルスの転写調節因子TatとGFPの発現のみを行う非増殖型HIVベクター(singl eround-HIV, SR-HIV)を用いて、ヒト血液幹細胞移植マウス(ヒト化マウス)で感染実験を行った。SR-HIV感染2週間後のヒト化マウスの抹消Tリンパ球において、恒常的GFP陽性細胞と、CD3とIL-2の増殖刺激環境下でGFP発現が誘導される細胞が検出された。しかしながら、分離解析できるほどの感染細胞数は得られなかった。さらなる解析のためにはSR-HIVのヒト血液幹細胞への導入効率を増加させる手法を用いる必要がある。
H23年度はHIVプロウイルスの組込み位置とHIVの潜伏化の相関を解析することを目的として、linker PCR法を用いたHIVの組込み位置解析方法を確立した。これまでの我々の研究で、インテグラーゼ(IN)非依存的に組込まれたHIVプロウイルスからのウイルス発現量は、IN依存的に組込まれたものに比して低い事が明らかになっていた。H23年度はこの方法を用いて、ウイルス組込み経路の違いにより誘導されるウイルス発現量の違いが、HIVの組込み位置によって決定されていることを明らかにした(Virology. 2012 25;427(1):44-50)。

研究成果

• [雑誌論文] Integrase-independent HIV-1 infection is augmented under conditions of DNA damage and produces a viral reservoir (2012)
  • 著者名/発表者名: Ebina H, Kanemura Y, Suzuki Y, Urata K, Misawa N, Koyanagi Y
  • 雑誌名: Virology 巻: 427 ページ: 44-50
  • DOI: 10.1016/j.virol.2012.02.004
  • 査読あり
• [雑誌論文] APOBEC1-Mediated Editing and Attenuation of Herpes Simplex Virus 1 DNA Indicate That Neurons Have an Antiviral Role during Herpes Simplex Encephalitis (2011)
  • 著者名/発表者名: Gee P, Ando Y, Kitayama H, Yamamoto SP, Kanemura Y, Ebina H, Kawaguchi Y, Koyanagi Y
  • 雑誌名: Journal of Virology 巻: 85 ページ: 9726-9736
  • DOI: 10.1128/JVI.05288-11
  • 査読あり
• [雑誌論文] The hematopoietic cell-specific Rho GTPase inhibitor ARHGDIB/D4GDI limits HIV-1 replication
  • 著者名/発表者名: Watanabe T, Urano E, Miyauchi K, Ichikawa R, Hamatake M, Misawa N, Sato K, Ebina H, Koyanagi Y, Komano J
  • 雑誌名: AIDS Research and Human Retroviruses 巻: (in press)
  • DOI: 10.1089/aid.2011.0180
  • 査読あり
• [学会発表] Integrase-independent HIV-1 infection is augmented under condition of DNA damage and produces a viral reservoir (2011)
  • 著者名/発表者名: Ebina H., Kanemura Y., Suzuki Y., Urata K., Misawa N., Koyanagi
  • 学会等名: 第34回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(横浜市)
  • 年月日: 2011-12-14
• [学会発表] Construction of labeling method for nucleosome-formed viral DNA (2011)
  • 著者名/発表者名: Ebina H., Urata K., Kanemura Y., Koyanagi Y.
  • 学会等名: 第34回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(横浜市)
  • 年月日: 2011-12-13
• [学会発表] APOBEC1-mediated editing and attenuation of HSV-1 UNA implicates an antiviral role in neurons during encephalitis (2011)
  • 著者名/発表者名: Gee P., Ando Y., Kitayama H., Yammaoto S.P., Kanemura Y., Ebina H., Kawaguchi Y., Koyanagi Y.
  • 学会等名: 第40回日本免疫学会
  • 発表場所: 幕張メッセ(千葉市)
  • 年月日: 2011-11-27
• [学会発表] Biochemical characterization of the HIV-1 restriction factor SAMHD1 (2011)
  • 著者名/発表者名: Gee P., Okamoto S., Fukuhara M., Kanemura Y., Ebina H., Koyanagi Y.
  • 学会等名: 12th Kumamoto AIDS Seminar-GCOE Joint International Symopsium
  • 発表場所: 阿蘇リゾートグランヴィリオホテル(阿蘇市)
  • 年月日: 2011-10-21
• [学会発表] HIV-1 cDNA integration and persistent infection by DNA repair system (2011)
  • 著者名/発表者名: Ebina H., Kanemura Y., Suzuki Y., Urata K., Koyanagi Y.
  • 学会等名: XV International Congress of Virology
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター(札幌市)
  • 年月日: 2011-09-15
• [学会発表] The hematopoietic cell-specific Rho GTPase inhibitor ARHGDIB/D4GDI limits HIV-1 replication (2011)
  • 著者名/発表者名: Watanabe T., Urano E., Miyauchi K., Ichikawa R., Hamatake M., Sato K., Hirotaka E., Koyanagi Y., Koraanao J.
  • 学会等名: XV International Congress of Virology
  • 発表場所: 札帆コンベンションセンター(札幌市)
  • 年月日: 2011-09-13
• [学会発表] Integrase independent retroviral cDNA integration, which is indefensible with integrase inhibitor (2011)
  • 著者名/発表者名: Ebina H., Kanemura Y., Suzuki Y., Urata K., Koyanagi Y.
  • 学会等名: 第6回研究所ネットワーク国際シンポジウム
  • 発表場所: 東京医科歯科大学(東京都)
  • 年月日: 2011-06-09
• [備考]
  • URL: http://www.virus.kyoto-u.ac.jp/Lab/saito/TOP.html