研究課題
TGF-β1結合蛋白質LTBP-1には亜型のLTBP-1L(long)とLTBP-1S(short)があり,私たちは癌で高発現しているLTBP-1Lに着日して継続的に解析を進めてきた。本研究では、LTBP-1LとLTBP-1Sを蛋白質発現レベルで区別して、癌との関係を明らかにすることを目的とし、本年度はまず、LTBP-1Lを特異的に認識する抗体の作製を行った。LTBP-1Lにのみ存在するアミノ酸配列と、LTBP-1SとLTRP-1Lに共通のアミノ酸配列をそれぞれGST融合蛋白質として大腸菌で発現・精製し抗原とし、ラットを用いてそれぞれの特異抗体を作製しELISA法により抗体価を測定した。市販の共通認識抗体に比較すると抗体価は低かったが、今後この抗体を使用して、多臓器の癌の臨床症例組織で同蛋白の発現を調べる予定である。また、胃がん培養細胞株TMK1において、RNA干渉によりLTBP-1の発現を抑制し、細胞増殖能や遊走活性の変化を調べた。この細胞株では発現抑制による顕著な変化は観察されなかった。この結果は、これまでの他の臓器がんと異なるものであり、もともとの発現最が低いためと考えられた。そこで、高発現による機能解析が必要と考え、胃がん培養細胞株MKN1,NUGC3においてLTBP-1L、LTBP-1Sそれぞれの安定発現株を作製した。今後これらの細胞株を使用して機能解析を行う。
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Science of the Total Environment
巻: 408 ページ: 4556-4562
Food and Chemical Toxicology
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