小胞輸送分子ESCRTを介したC型肝炎ウイルスの感染制御

2011 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 22790630
• 研究機関: 地方独立行政法人宮城県立病院機構宮城県立がんセンター(研究所)
• 研究代表者: 玉井 恵一 地方独立行政法人宮城県立病院機構宮城県立がんセンター(研究所), がん先進治療開発研究部, 主任研究員 (40509262)
• キーワード: ESCRT / Hrs / exosomes / HCV

研究概要

(1)ESCRT分子のHCVにおける役割を検討するために、まず、HCVが含まれるとされるエクソゾームとHrsの関連性を検討した。Hrsノックアウト樹状細胞においては、エクソゾームの放出量が抑制されており、ovalbuminによって刺激を行い、そのエクソゾームを回収したところ、OT-IトランスジェニックマウスのT細胞に対する抗原提示能も減少していた。以上のことからHrsはエクソゾーム放出に必須の分子であり、エクソゾームを介した抗原提示能にも関わっている可能性が示唆された。(BBRC,2010)
(2)HrsノックダウンHuh7細胞にHCV株JFH1を感染させると、上清中に放出されるHCV-RNAは有意に減少した。細胞内HCV-RNAやコアタンパク発現量には変化がなかったが、細胞内の感染性HCV粒子はHrsノックダウン細胞において減少していた。以上のことから、HrsはHCVアセンブリに関与している可能性が示唆された。
(3)HCV感染細胞の上清を精製し、ショ糖密度勾配遠心にて分画すると、HCVコアタンパクとエクソゾームマーカーであるCD63はほぼ同じ分画に存在した。共焦点顕微鏡を用いて観察すると、multivesicular bodyとHCVコアタンパクは部分的に共局在しており、免疫電顕をおこなうと、HCVコアタンパクおよびエンベロープタンパクはmultivesicular body内のintraluminal vesicleにも存在していた。MVB形成に必須とされるVPS4ノックダウン細胞においても、HCV放出の減少がみられた。エクソゾーム放出に必須のRab27bノックダウン細胞においても、HCV放出の減少がみられた。以上のことからHCVはHrs依存性エクソゾーム経路を利用している可能性が示唆された。(Virology,2012)

研究成果

• [雑誌論文] Regulation of hepatitis C virus secretion by the Hrs-dependent exosomal pathway (2012)
  • 著者名/発表者名: K. Tamai, M. Shiina, N. Tanaka, T. Nakano, A. Yamamoto, Y. Kondo, E. Kakazu, J. Inoue, K. Fukushima, K. Sano, Y. Ueno, T. Shimosegawa, K. Sugamura
  • 雑誌名: Virology 巻: 422 ページ: 377-385
  • DOI: DOI:10.1016/j.virol.2011.11.009
• [雑誌論文] Four-year study of lamivudine and adefovir combination therapy in lamivudine-resistant hepatitis B patients : influence of hepatitis B virus genotype and resistance mutation pattern (2011)
  • 著者名/発表者名: J. Inoue, Y. Ueno, Y. Wakui, H. Niitsuma, K. Fukushima, Y. Yamagiwa, M. Shiina, Y. Kondo, E. Kakazu, K. Tamai, N. Obara, T. Iwasaki, T. Shimosegawa
  • 雑誌名: J Viral Hepat 巻: 18 ページ: 206-215
  • DOI: DOI:10.1111/j.1365-2893.2010.01301.x
• [雑誌論文] Plasma L-cystine/L-glutamate imbalance increases tumor necrosis factor-alpha from CD 14+ circulating monocytes in patients with advanced cirrhosis (2011)
  • 著者名/発表者名: Kakazu E, Tamai K (9/10), et al
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 6 ページ: e23402
  • DOI: doi:10.1371/journal.pone.0023402
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lymphotropic HCV strain can infect human primary naive CD4+ cells and affect their proliferation and IFN_<-Y> secretion activity (2011)
  • 著者名/発表者名: Kondo Y, Ueno Y, Tamai K (6/10), et al
  • 雑誌名: J Gastroenterol 巻: 46 ページ: 232-41
  • DOI: doi:10.1007/s00535-010-0297-2
  • 査読あり