研究課題
(1)遺伝子解析研究・DNAシークエンス:血中アディボネクチン(ADPN)レベルが極度に低い症例のDNAについて、イントロンを含む全長直接シーケンスを行ったが、ADPN遺伝子の大きなDeletion/Ihsertion(欠失/挿入)多型は検出しなかった。・関連解析:血中アディポネクチン(ADPN)レベルが極度に低い新規SNPと疾患との関連について、これまで大阪大学が保有する集団(約800名)において見出された結果が他集団でも同様か検討した。一般住民集団を対象とした端野・壮瞥町研究を保有する札幌医大第二内科と共同研究の体制を構築し、SNPと疾患との関連を検証した結果、これまでの同様の結果を得た。(2)タンパク質の組成解析・SDS page:新規SNPを保有すると、野生型とは異なる単量体を発現することを検出している。ADPNは、Collagen like domainやGlobular domainなど、いくつかのドメインから構成されているが、複数種のモノクローナル抗体を用いることで、野生型との発現を比較したところ、相違をきたすドメインを同定した。・2D page:ADPN単量体は、二次元電気泳動(2D Page)で8つに分離される。2D Pageで新規SNP群と野生・健常群を比較した。銀染色で検出した結果では、野生型と新規SNP群に明らかな違いは見出せなかった。(3)プロテオーム解析上記で同定した相違する単調本Acrp30のスポットゲルをプロテアーゼで消化し、LS-MS/MS分析によりMS/MSデータと照会して同定した。
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