日本人の遺伝的易血栓性に関わる点変異ノックインマウスの樹立と解析

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22790923
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 血液内科学
• 研究機関: 独立行政法人国立循環器病研究センター
• 研究代表者: 坂野 史明 独立行政法人国立循環器病研究センター, 研究所, 研究員 (00373514)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• キーワード: プロテインS / プラスミノーゲン / ノックインマウス / 遺伝子変異 / 日本人の血栓症 / 血液凝固 / 線溶

研究概要

日本人には凝固制御因子プロテインS(PS)のK196E変異が約55人に1人の頻度で存在し、静脈血栓症の遺伝的リスクとなっている。また、線溶因子プラスミノーゲン(PLG)のA620T変異(マウスではA622T)も日本人の約25人に1人の頻度で認められ、潜在的な血栓性リスクとなっている可能性がある。本研究では、これらの変異の影響を個体レベルで解析するため、PS-K196E変異および、PLG-A622T変異のノックインマウスを樹立した。肺塞栓誘発モデルを用いた解析の結果、PS-K196Eマウスでは肺血管閉塞が亢進し、野生型マウスに比べて高い死亡率を示したことから、PS-K196E変異が肺塞栓症等の静脈血栓症の増悪要因となることが明らかとなった。動脈血栓症へのPS-K196E変異の影響を調べるため、中大脳動脈閉塞による脳虚血再灌流実験を行った結果、白人型血栓症モデルである凝固第V 因子-Leidenマウスとは異なり、PS-K196Eマウスの脳梗塞症状は野生型マウスと差は見られなかった。凝固第V 因子-Leiden変異は白人の若年性脳梗塞リスクとして報告されているが、PS-K196E変異と脳梗塞との関連を示す報告はない。PS-K196Eマウスはこれと矛盾しない表現型を呈しており、日本人型血栓症の特徴や治療応答性を解析するための良いモデル動物になると考えられる。一方、PLG-A622Tマウスでは、肺塞栓、脳梗塞症状ともに悪化は認められなかったことから、少なくとも本変異単独ではこれらの血栓症の原因とはならないと考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] ADAMTS13 safeguards the myocardium in a mouse model of acute myocardial infarction (2012)
  • 著者名/発表者名: Doi M, Matsui H, Takeda Y, Saito Y, Takeda M, Matsunari Y, Nishio K, Shima M, Banno F, Akiyama M, Kokame K, Miyata T, Sugimoto M
  • 雑誌名: Thromb Haemost 巻: 108 ページ: 1236-1238
  • DOI: DOI:10.1160/TH12-09-0674
  • 査読あり
• [雑誌論文] ADAMTS13 gene deletion enhances plasma high-mobility group box1 elevation and neuroinflammation in brain ischemia-reperfusion injury (2012)
  • 著者名/発表者名: Fujioka M, Nakano T, Hayakawa K, Irie K, Akitake Y, Sakamoto Y, Mishima K, Muroi C, Yonekawa Y, Banno F, Kokame K, Miyata T, Nishio K, Okuchi K, Iwasaki K, Fujiwara M, Siesjo BK
  • 雑誌名: Neurol Sci 巻: 33 ページ: 1107-1115
  • DOI: DOI:10.1007/s10072-011-0913-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] ADAMTS13研究の最先端 (2012)
  • 著者名/発表者名: 宮田敏行, 小亀浩市, 秋山正志, 坂野史明, 中山大輔, 武田壮一
  • 雑誌名: 臨床血液 巻: 53 ページ: 672-679
  • DOI: DOI:10.11406/rinketsu.53.672
  • 査読あり
• [雑誌論文] Large infarct and high mortality by cerebral ischemia in mice carrying the factor V Leiden mutation (2012)
  • 著者名/発表者名: Kita T, Banno F, Yanamoto H, Nakajo Y, Iihara K, Miyata T
  • 雑誌名: J Thromb Haemost 巻: 10 ページ: 1453-1455
  • DOI: DOI:10.1111/j.1538-7836.2012.04776.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] RGS2 deficiency in mice does not affect platelet thrombus formation at sites of vascular injury (2012)
  • 著者名/発表者名: Banno F, Nojiri T, Matsumoto S, Kamide K, Miyata T
  • 雑誌名: J Thromb Haemost 巻: 10 ページ: 309-311
  • DOI: DOI:10.1111/j.1538-7836.2011.04575.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vivo imaging analysis of the interaction between unusually large von Willebrand factor multimers and platelets on the surface of vascular wall (2011)
  • 著者名/発表者名: Rybaltowski M, Suzuki Y, Mogami H, Chlebinska I, Brzoska T, Tanaka A, Banno F, Miyata T, Urano T
  • 雑誌名: Pflugers Archiv 巻: 461 ページ: 623-633
  • DOI: DOI:10.1007/s00424-011-0958-x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impact of RGS2 deficiency on therapeutic effect of telmisartan in angiotensin II-induced aortic aneurysm (2011)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto S, Kamide K, Banno F, Inoue N, Mochizuki N, Kawano Y, Miyata T
  • 雑誌名: Hypertens Res 巻: 33 ページ: 1244-1249
  • DOI: DOI:10.1038/hr.2010.184
  • 査読あり
• [雑誌論文] GFP強発現ADAMTS13遺伝子欠損マウスの生体内イメージング解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 浦野哲盟, 鈴木優子, 最上秀夫, 坂野史 明
  • 雑誌名: 血栓と循環 巻: 18 ページ: 92-95
  • URL: http://mol.medicalonline.jp/library/journal/abstract?GoodsID=ai1ksjkb/2010/001802/001&name=0092-0095j
• [雑誌論文] ADAMTS13のC端末ドメイン欠損マウス (2010)
  • 著者名/発表者名: 坂野史明, 小亀浩市
  • 雑誌名: 血栓と循環 巻: 18 ページ: 4-7
  • DOI: http://mol.medicalonline.jp/library/journal/abstract?GoodsID=ai1ksjkb/2010/001801/001&name=0004-0007j
• [雑誌論文] ADAMTS13 gene deletion aggravates ischemic brain damage : A possible neuroprotective role of ADAMTS13 by ameliorating post-ischemic hypoperfusion (2010)
  • 著者名/発表者名: Fujioka M, Hayakawa K, Mishima K, Kunizawa A, Irie K, Higuchi S, Nakano T, Muroi C, Fukushima H, Sugimoto M, Banno F, Kokame K, Miyata T, Fujiwara M, Okuchi K, Nishio K
  • 雑誌名: Blood 巻: 115 ページ: 1650-1653
  • DOI: DOI:10.1182/blood-2009-06-230110
  • 査読あり
• [雑誌論文] The function of ADAMTS13 in thrombogenesis in vivo : insights from mutant mice (2010)
  • 著者名/発表者名: Banno F, Chauhan AK, Miyata T
  • 雑誌名: Int J Hematol 巻: 91 ページ: 30-35
  • DOI: DOI:10.1007/s12185-009-0477-0
  • 査読あり
• [学会発表] 日本人の遺伝的血栓性リスクを有するモデルマウスの作製と解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 坂野史明, 喜多俊行, 柳本広二, 小亀浩市, 宮田敏行
  • 学会等名: 第85回日本生化学会大会
  • 発表場所: 福岡国際会議場
  • 年月日: 2012-12-16
• [学会発表] Protective role of ADAMTS13 for myocardium in mouse model of experimental myocardial infarction (2012)
  • 著者名/発表者名: Doi M, Matsui H, Takeda Y, Saito Y, Takeda M, Matsunari Y, Nishio K, Shima M, Banno F, Akiyama M, Kokame K, Miyata T, Sugimoto M
  • 学会等名: 54th ASH Annual Meeting and Exposition
  • 発表場所: Georgia World Congress Center, USA
  • 年月日: 2012-12-09
• [学会発表] ADAMTS13 improving the cell engraftment efficacy in mouse model of bone marrow transplantation (2012)
  • 著者名/発表者名: Matsui H, Doi M, Matsunari Y, Takeda M, Nishio K, Shima M, Soejima K, Banno F, Akiyama M, Kokame K, Miyata T, Sugimoto M
  • 学会等名: 54th ASH Annual Meeting and Exposition
  • 発表場所: Georgia World Congress Center, USA
  • 年月日: 2012-12-08
• [学会発表] プロテインS徳島(K196E)変異がマウスの肺塞栓症および虚血性脳梗塞に及ぼす影響 (2012)
  • 著者名/発表者名: 坂野史明, 喜多俊行, 柳本広二, 小亀浩市, 宮田敏行
  • 学会等名: 第74回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: 京都国際会館
  • 年月日: 2012-10-20
• [学会発表] ADAMTS13研究の最先端 (2011)
  • 著者名/発表者名: 宮田敏行, 小亀浩市, 秋山正志, 武田壮一, 坂野史明
  • 学会等名: シンポジウム6, 第73回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場
  • 年月日: 2011-10-15
• [学会発表] 血液凝固第V 因子Leiden変異マウスの虚血性脳梗塞に対する脆弱性 (2011)
  • 著者名/発表者名: 喜多俊行, 坂野史明, 中城有香子, 柳本広二, 飯原弘二, 宮田敏行
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都国際会館
  • 年月日: 2011-09-24
• [学会発表] Factor V Leiden mice are vulnerable for ischemic stroke (2011)
  • 著者名/発表者名: Kita T, Banno F, Nakajo Y, Yanamoto H, Iihara K, Miyata T
  • 学会等名: The International Society on Thrombosis and Haemostasis XXIII Congress
  • 発表場所: Kyoto International Conference Center
  • 年月日: 2011-07-28
• [学会発表] Generation of knock-in mice carrying a K196E point mutation in protein S (2011)
  • 著者名/発表者名: Banno F, Kita T, Yanamoto H, Kokame K, Iihara K, Miyata T
  • 学会等名: The International Society on Thrombosis and Haemostasis XXIII Congress
  • 発表場所: Kyoto International Conference Center
  • 年月日: 2011-07-27
• [学会発表] A lack of regulator of G-protein signaling 2 (RGS2) in mice does not affect thrombus formation at sites of vascular injury (2011)
  • 著者名/発表者名: Banno F, Nojiri T, Matsumoto S, Kamide K, Mochizuki N, Miyata T
  • 学会等名: The International Society on Thrombosis and Haemostasis XXIII Congress
  • 発表場所: Kyoto International Conference Center
  • 年月日: 2011-07-27
• [学会発表] Imaging analysis of the interaction between unusually large von-Willebrand factor multimers and platelets on vascular endothelial cells in living animals (2011)
  • 著者名/発表者名: Brzoska T, Rybaltowski M, Suzuki Y, Mogami H, Chlebinska I, Tanaka A, Banno F, Miyata T, Urano T
  • 学会等名: The International Society on Thrombosis and Haemostasis XXIII Congress
  • 発表場所: Kyoto International Conference Center
  • 年月日: 2011-07-26
• [学会発表] Genetic mouse models for evaluating pathophysiological roles of ADAMTS13 (2011)
  • 著者名/発表者名: Banno F
  • 学会等名: 57th Annual SSC Meeting of the International Society on Thrombosis and Haemostasis
  • 発表場所: Kyoto International Conference Center
  • 年月日: 2011-07-23
• [学会発表] 血流下血栓形成におけるregulator of G protein signaling2(RGS2)の生理的意義 (2010)
  • 著者名/発表者名: 坂野史明, 野尻卓宏, 松本幸子, 神出計, 望月直樹, 宮田敏行
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド
  • 年月日: 2010-12-10
• [学会発表] The Impact of RGS2 deficiency on the therapeutic effect of telmisartan in angiotensin II-induced vascular remodeling (2010)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto S, KamideK, Banno F, Inoue N, Mochizuki N, Kawano Y, Miyata T
  • 学会等名: The 23rd Scientific Meeting of the International Society of Hypertension
  • 発表場所: Vancouver Convention Centre, Canada
  • 年月日: 2010-09-29
• [学会発表] Rgs2欠損マウスの血小板血栓形成能の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 坂野史明, 野尻卓宏, 松本幸子, 神出計, 宮田敏行
  • 学会等名: 第33回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 城山観光ホテル
  • 年月日: 2010-04-24
• [図書] 遺伝子改変血栓症モデル,北徹, 堀内久徳, 柳田素子, 猪原匡史, 冨本秀和, 並河徹編疾患モデルの作製と利用-循環器疾患 (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮田敏行, 水口純, 坂野史明
  • 総ページ数: 226-233
  • 出版者: エル・アイ・シー