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2012 年度 実績報告書

質量分析計を利用した血中小麦タンパク質の網羅的分析と体内動態の解析

研究課題

研究課題/領域番号 22790930
研究機関島根大学

研究代表者

高橋 仁  島根大学, 医学部, 助教 (10432618)

研究期間 (年度) 2010-04-01 – 2013-03-31
キーワード食物アレルギー / 抗原 / IgE
研究概要

小麦依存性運動誘発アナフィラキシー(Wheat-dependent exercise-induced anaphylaxis: WDEIA)は、小麦製品を摂取した後、運動負荷などの二次的な要因が加わって発症する小麦アレルギーの一病型である。主要な抗原として、ω-5グリアジンと高分子量グルテニンが同定されている。
リコンビナントω-5グリアジンを抗原とした抗原特異的IgE検査 (CAP-FEIA法) は、既存の小麦およびグルテンを抗原としたCAP-FEIA法よりも感度および特異度が高く、患者の8割が検出でき、WDEIAの診断に有用であることが明らかとなっている。残りの2割のWDEIA患者は高分子量グルテニンによって検出されることが予想される。そこで、リコンビナント高分子量グルテニン (rHMW-G) を用いたCAP-FEIA法の有用性について検討した。
rHMW-Gは大腸菌にてヒスチジンタグ付きタンパク質として発現させ、ニッケルアフィニティークロマトグラフィーを用いて精製した。精製したrHMW-GはCAP-FEIAに固相化した。48名のWDEIA患者、16名のアトピー性皮膚炎患者、12名の健常人の血清を対象とし、rHMW-Gに対する特異的抗体価をCAP-FEIA法を用いて測定した。
rHMW-Gを用いたCAP-FEIA法は、小麦から精製したnative 高分子量グルテニンを用いたCAP-FEIA法よりも非特異的な反応が少ないことが明らかとなった。rHMW-Gの感度および特異度は、16.7%、92.9%であったが、リコンビナントω-5グリアジンに対する結果を加えると、感度および特異度は93.8%、92.9%であった。この結果から、rHMW-Gは、CAP-FEIA法の固相化に安定であり、rHMW-Gを用いたCAP-FEIA法は、WDEIAの診断に有用であることが明らかとなった。

現在までの達成度 (区分)
理由

24年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

24年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2013 2012

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件)

  • [雑誌論文] Serum Gliadin Monitoring Extracts Patients with False Negative Results in Challenge Tests for the Diagnosis of Wheat-Dependent Exercise-Induced Anaphylaxis.2013

    • 著者名/発表者名
      Kohno K, Matsuo H, Takahashi H, Niihara H, Chinuki Y, Kaneko S, Honjoh T, Horikawa T, Mihara S, Morita E.
    • 雑誌名

      Allergol Int.

      巻: 掲載確定 ページ: 掲載確定

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Recombinant high molecular weight-glutenin subunit-specific IgE detection is useful in identifying wheat-dependent exercise-induced anaphylaxis complementary to recombinant omega-5 gliadin-specific IgE test.2012

    • 著者名/発表者名
      Takahashi H, Matsuo H, Chinuki Y, Kohno K, Tanaka A, Maruyama N, Morita E.
    • 雑誌名

      Clin Exp Allergy.

      巻: 42 ページ: 1293-1298

    • DOI

      10.1111/j.1365-2222.2012.04039.x.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Prevalence of wheat allergy in Japanese adults2012

    • 著者名/発表者名
      Morita E, Chinuki Y, Takahashi H, Nabika T, Yamasaki M, Shiwaku K.
    • 雑誌名

      Allergol Int.

      巻: 61 ページ: 101-105

    • DOI

      10.2332/allergolint.11-OA-0345

    • 査読あり

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公開日: 2014-07-24  

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