新規RhoファミリーG蛋白質活性化因子DOCK4を介した大腸癌進展機構の解析

2011 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 22791276
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 河田 健二 京都大学, 医学研究科, 助教 (90322651)
• キーワード: 癌 / 転移 / 浸潤

研究概要

受容体型チロシンキナーゼ・シグナルにおけるDOCK4-Grb2複合体の役割を検討するため、ヒト大腸癌細胞株HCT116にDOCK4を強制発現させた細胞株とDOCK4の発現をshRNAで抑制した細胞株をレンチウイルスを使って樹立し、こららの細胞株を使ったmigration assay実験およびエンドサイトーシス実験からは、DOCK4-Grb2複合体がEGF受容体とcomplexを形成し、EGF刺激による細胞運動およびEGF受容体のエンドサイトーシスにおいて必須の役割を担っていることが明らかとなった。さらに足場非依存性増殖、マウスモデルでの増殖・転移能についても現在検討を進めている。
また大腸癌のおけるEGFRシグナルの下流にある遺伝子変異(KRAS変異)とDOCK4がどのように関わるのか、2つのヒト大腸癌細胞株(HCT116細胞株、DLD1細胞株)においてKRAS変異をwildalleleに相同的遺伝子組み換えによって樹立した細胞株をつかって検討した。KRAS変異株ではKRAS wild-type株に比べ、EGF刺激に対する細胞運動およびEGF受容体のエンドサイトーシスが抑制されていたが、DOCK4を強制発現させることでDOCK4-Grb2複合体の機能が亢進し、細胞運動やエンドサイトーシスといった癌悪性化過程が修飾されることを明らかにした。また大腸癌臨床検体を用いた検討では、深達度が増すにつれてDOCK4発現が亢進すること、さらにKRAS遺伝子変異とともに腫瘍の悪性化に関与していることが明らかとなった。

研究成果

• [雑誌論文] Molecular mechanisms of liver metastasis (2011)
  • 著者名/発表者名: Kawada K, Hasegawa S, Murakami T, Itatani Y, Hosogi H, Sonoshita M, Kitamura T, Fujishita T, Iwamoto M, Matsumoto T, Matsusue R, Hida K, Akiyama G, Okoshi K, Yamada M, Kawamura J, Taketo MM, Sakai Y
  • 雑誌名: Int J Clin Oncol 巻: 16(5) ページ: 464-72
  • DOI: DOI:10.1007/s10147-011-0307-2
  • 査読あり
• [雑誌論文] Significance and mechanism of lymph node metastasis in cancer progression (2011)
  • 著者名/発表者名: 河田健二、武藤誠
  • 雑誌名: Cancer Research 巻: 71 ページ: 1214-1218
  • DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-10-3277
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transcriptional factor Proxl plays an essential role on the antiproliferative action of interferon-g in esophageal cancer cells (2011)
  • 著者名/発表者名: 赤神正敏、河田健二、久保肇, 他
  • 雑誌名: Annals of Surgical Oncology 巻: 18 ページ: 3868-3877
  • DOI: 10.1245/s10434-011-1683-6
  • 査読あり