| 研究課題/領域番号 |
22791611
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| 研究機関 | 熊本大学 |
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研究代表者 |
伊勢 桃子 熊本大学, 医学部附属病院, 医員 (20573596)
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| キーワード | 再生医学 / ラセン神経節 / PC3 / 神経突起 |
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| 研究概要 |
ラセン神経節細胞は、蝸牛有毛細胞によって機械的エネルギーから電気的エネルギーへと変換された音情報を脳へと伝達するという聴覚機能において極めて重要な役目を担っている。しかしながら、これまでラセン神経節細胞の発生・分化のメカニズムはこれまで不明であった。最近我々は増殖抑制遺伝子の一つであるPC3が胎生期の蝸牛ラセン神経節細胞に発現しており、ラセン神経節細胞の発生・分化に関与している可能性を初めて報告した。本研究はこの結果をもとにして、単離ラセン神経節細胞を用いたPC3発現抑制の効果を見ることにより、PC3のラセン神経節細胞の発生・分化に対する関与をより明確にすることを目的とした。
胎生14日目、胎生16日目、胎生20日目、生後4日目の正常ラットからラセン神経節を採取し、トリプシン処理によって細胞単位に単離し、単離培養ラセン神経節細胞におけるPC3の細胞内局在の確認を行うために、単離直後と1日間37℃、CO_25%の環境下でその局在が変化しないことを確認した。平成22年度には胎生20日目ではPC3は細胞質に、生後4日目では核にその局在を認め、培養1日後もこの局在に変化はなかったことを確認できたが、胎生14日目、胎生16日目のラットラセン神経節細胞については、培養条件の確立に至らなかった。本年度も引き続き胎生14日目および16日目のラットラセン神経節細胞の培養を行ったが、培養条件を確立するに至らなかった。今年度は、培養条件が確立している胎生20日目および生後4日目のラセン神経節細胞に対して、PC3.siRNAを導入し、3日間培養後にPC3タンパクの発現抑制により生じるラセン神経節細胞の形態変化について検討する予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
胎生期のラットラセン神経節細胞の培養については、コンタミネーションや採取細胞数の少なさなどが原因で条件を確立させることが困難であった。
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| 今後の研究の推進方策 |
平成24年度は、すでに培養条件がある程度確立している胎生20日目および生後4日目に対して、PC3.siRNAを導入し、3日間培養後にPC3タンパクの発現抑制により生じるラセン神経節細胞の形態変化について検討する予定である。
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