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今までに我々は、脈絡膜血管新生の病態における樹状細胞の重要性について報告し、今年度我々は下記の実験を施行した。
まず、樹状細胞ノックアウト遺伝子改変マウスを入手し、レーザー照射による脈絡膜新生血管のサイズを正常マウスと、遺伝子改変マウス数を20に増やし（当施設10匹、ハーバード大学にて10匹）検討したところ、やはり今までと同様、有意に脈絡膜新生血管サイズの縮小を認めた。また、以前から問題になっている体重減少については、DT濃度を以前の報告の半分に希釈投与にて、樹状細胞が70%程度除去でき、この設定を採用している。
新生血管のassayである角膜ポケット法、また、マウスの背中fibronectinやコラーゲンとともに樹状細胞を埋植しての新生血管assay法にても、やはり同様に、新生血管サイズのfibronectinゲルへの侵入の現象を認めた。
我々の実験では、immature-DCが新生血管能が高く、mature-DCとのサイトカイン分泌能について比較検討もしている。VEGF、TNFa、MCP-1などについて検討し、MCP-1だけに差を認めた。しかしマクロファージの眼内への流入数をフローサイトメトリーにて検討したところ、両者に差をみとめず、この乖離については、引き続き検討予定である。
今後の予定は、予め染色したDCをマウスに注入した上で、角膜ポケット法にて新生血管を観察したところ、血管壁にそって染色されたDCが分布しているように観察されたことより、DCが血管内皮細胞へと分化した可能性が考えられる。もう少し詳細に電子顕微鏡などを用いて。詳細に解析を施行したい。これとよく似た現象論の論文は過去にあるので、今後我々は、DCが、あるサイトカインの存在下では、内皮様の細胞、もしくは内皮細胞へとcharacterが変化するのではと考え、この辺りをつめて、最終年度に論文として仕上げる予定である。
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