マウス表皮細胞から角膜上皮細胞への形質転換に関わる因子の検討

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22791665
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 眼科学
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 小林 剛 愛媛大学, 大学院・医学系研究科, 寄附講座助教 (70380285)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2011
• キーワード: 角膜上皮再生医療 / 表皮前駆細胞 / 角膜上皮細胞 / 形質転換 / ケラチン12 / 角膜実質 / 角膜輪部

研究概要

自己の表皮細胞から角膜上皮細胞への形質転換が可能となれば角膜再生医療は飛躍的に進歩すると考えられる。我々は、角膜特異的分化マーカーであるサイトケラチン12(K12)の発現により緑色蛍光タンパク質(GFP)を発現するTgマウス(K12Cre/ZEGマウス)由来の表皮細胞と野生型マウスの強角膜片を用いた器官培養を行い、マウス表皮細胞から角膜上皮様細胞への形質転換が可能であることを示した。さらに免疫組織学的検討を行い、角膜周辺部(輪部)の細胞外基質または輪部由来液性因子がK12の発現誘導または上皮細胞の分化運命決定に重要な役割を担っていることを明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Important Role of Epiregulin in Inflammatory Responses During Corneal Epithelial Wound Healing (2012)
  • 著者名/発表者名: Zhang Y, Kobayashi T, Hayashi Y, Yoshioka R, Shiraishi A, Shirasawa S, Higashiyama S, Ohashi Y
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci 巻: (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Use of 5-cyano-2, 3-ditolyl-tetrazolium chloride(CTC) staining as Indicator of Biocidal Activity in Rapid Assay for Anti-Acanthamoeba Agents (2012)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi T, Mito T, Watanabe N, Suzuki T, Shiraishi A, Ohashi Y
  • 雑誌名: J Clin Microbiol 巻: (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficacy of commercial soft contact lens disinfectant solutions against Acanthamoeba (2011)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi T, Gibbon L, Mito T, Shiraishi A, Uno T, Ohashi, Y
  • 雑誌名: Jpn J Ophthalmol 巻: 55 ページ: 547-557
  • 査読あり
• [雑誌論文] Corneal Epithelial Wound Healing Impaired in Keratinocyte-Specific HB-EGF Deficient Mice In Vivo and In Vitro (2010)
  • 著者名/発表者名: 4) Yoshioka R, Shiraishi A, Kobayashi T, Morita S, Hayashi Y, Higashiyama S, Ohashi Y
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci 巻: 51 ページ: 5630-5639
  • 査読あり
• [学会発表] マウス表皮細胞から形質転換した角膜上皮細胞の免疫組織学的検討 (2012)
  • 著者名/発表者名: 小林剛、林康人、渡辺成美、白石敦、大橋裕一
  • 学会等名: 第36回日本角膜学会総会(角膜カンファランス2012)
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20120223-25
• [学会発表] Role of epiregulin in corneal epithelial wound healing (2010)
  • 著者名/発表者名: Zhang Y, Shiraishi A, Kobayashi T, Yoshioka R, Hayashi Y, Ohashi
  • 学会等名: The 25th Asia-Pacific Association of Ophthalmology Meeting
  • 発表場所: Beijing, China
  • 年月日: 20100916-20
• [学会発表] Epithelial sheets produced from cryopreserved human corneal epithelial cells using human dermal fibroblast-embedded collagen gel (2010)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi T, Shiraishi A, Yang L, Shirakata Y, Hashimoto K, Ohashi Y
  • 学会等名: XIX Biennial Meeting of the International Society for Eye Research(ISER 2010)
  • 発表場所: Montreal, QC, Canada
  • 年月日: 20100718-23
• [学会発表] Murine Epidermal Cells Can be Transdifferentiated Into Corneal Epithelial-Like Cells in the Corneal Epithelial Environment (2010)
  • 著者名/発表者名: Shiraishi A, Kobayashi T, Hayshi Y, Ohashi Y
  • 学会等名: The Association for Research in Vision and Ophthalmology(ARVO) 2010 Annual Meeting
  • 発表場所: Fort Lauderdale, Florida, U. S. A.
  • 年月日: 20100502-06
• [学会発表] HB-EGF is Essential for Promotion of Cell Attachment and Proliferation in Corneal Wound Healing (2010)
  • 著者名/発表者名: Yoshioka R, Shiraishi A, Kobayashi T, Noda E, Hayashi Y, Ohashi Y
  • 学会等名: The Association for Research in Vision and Ophthalmology(ARVO) 2010 Annual Meeting
  • 発表場所: Fort Lauderdale, Florida, U. S. A.
  • 年月日: 20100502-06
• [学会発表] 培養マウス表皮細胞から角膜上皮様細胞への形質転換の検討. (2010)
  • 著者名/発表者名: 小林剛、林康人、白石敦、大橋裕一
  • 学会等名: 第114回日本眼科学会総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20100415-18