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2012 年度 実績報告書

Porphyromonas gingivalisのバイオフィルム関連分子の探索

研究課題

研究課題/領域番号 22791822
研究機関国立感染症研究所

研究代表者

中尾 龍馬  国立感染症研究所, その他部局等, 主任研究官 (10370959)

研究期間 (年度) 2010-04-01 – 2014-03-31
キーワードバイオフィルム / Porphyromonas gingivalis / LPS / 大腸菌
研究概要

これまでの研究から、Porphyromonas gingivalisのバイオフィルム形成にはLPSの糖鎖が関連することが明らかになっている。LPSのO多糖あるいはコア多糖の構成が明らかな大腸菌BW25113株を親株として用いて、様々なLPS糖鎖変異株におけるバイオフィルム形成を96穴プラスチックプレートのバイオフィルム形成試験などで調べたところ、O多糖やコア多糖の構成の違いによりバイオフィルム形成に影響を与えることが明らかとなった。大腸菌BW25113株のLPSコア多糖を構成する糖の数とバイオフィルム形成量は逆相関するという結果となった。また大腸菌コア多糖には3つのヘプトースが含まれるが、この3つすべてのヘプトースを欠損するLPS変異株hldE株は、野生株に比べ3~4倍もバイオフィルム形成能が高く、このバイオフィルム形成はDNase処理により大きく阻害されたことから、そのバイオフィルム形成機構は細胞外DNA依存性であることが示唆された。またhldE変異株は、48時間培養後もその内膜の連続性が保たれていたが、外膜は野生株に比べ菲薄であり連続性を失っていた。またO多糖を持たないBW25113株にwbbL遺伝子のin trans相補を行うことでO多糖産生を回復させると、バイオフィルム形成は低下した。したがって、O多糖の存在がバイオフィルム形成に影響与えることも明らかとなった。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

今期は、国内外学会発表5報、および学術雑誌への論文出版1報などの業績が得られたため。

今後の研究の推進方策

Porphyromonas gingivalisのバイオフィルム形成において重要な糖(鎖)を同定することを目的に、Porphyromonas gingivalis のLPS変異株の作成を行い、そのバイオフィルム形成を調べる。また、大腸菌バイオフィルムの過形成を引き起こすプラスミド遺伝子が存在する可能性があるので、これについて検討を行う。

  • 研究成果

    (7件)

すべて 2013 2012

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (5件) 産業財産権 (1件) (うち外国 1件)

  • [雑誌論文] Enhanced biofilm formation of Escherichia coli LPS mutants defective in Hep biosynthesis2012

    • 著者名/発表者名
      Ryoma Nakao
    • 雑誌名

      PLoS One

      巻: 7(12) ページ: e51241.

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0051241

    • 査読あり
  • [学会発表] Ig responses in mice after intranasal immunization of Porphyromonas gingivalis outer membrane vesicles2013

    • 著者名/発表者名
      中尾龍馬
    • 学会等名
      第86回日本細菌学会総会
    • 発表場所
      千葉県幕張市
    • 年月日
      20130318-20130320
  • [学会発表] Humoral immunity against Porphyromonas gingivalis in mice intranasally vaccinated with combination of outer membrane vesicles and synthetic2012

    • 著者名/発表者名
      中尾龍馬
    • 学会等名
      第16回日本ワクチン学会学術集会
    • 発表場所
      東京都
    • 年月日
      20121117-20121118
  • [学会発表] Role of Outer Membrane Vesicles of Porphyromonas gingivalis in Immunopathology of Periodontitis in Human.2012

    • 著者名/発表者名
      Ryoma Nakao
    • 学会等名
      第34回内藤カンファレンス 感染・炎症・免疫
    • 発表場所
      北海道札幌市
    • 年月日
      20121016-20121019
  • [学会発表] Outer membrane vesicles of P. gingivalis carry a variety of antigens and virulence factors.2012

    • 著者名/発表者名
      中尾龍馬
    • 学会等名
      第54回歯科基礎医学会学術集会・総会
    • 発表場所
      福岡県郡山市
    • 年月日
      20120914-20120916
  • [学会発表] Roles of outer membrane vesicles of Porphyromonas gingivalis for a mucosal immune response2012

    • 著者名/発表者名
      Ryoma Nakao
    • 学会等名
      First International Conference on Porphyromonas gingivalis and Related Bacterial Species
    • 発表場所
      長崎県長崎市
    • 年月日
      20120827-20120828
  • [産業財産権] Method of inspecting periodontal disease causing bacteria using outer membrane vesicle and measuring appliance of the same2013

    • 発明者名
      中尾龍馬、泉福英信、大西真、高山和人、内藤裕樹、佐久間徹郎
    • 権利者名
      株式会社ジーシー、国立感染症研究所
    • 産業財産権種類
      特許
    • 産業財産権番号
      EFS ID: 15143237
    • 出願年月日
      2013-03-08
    • 外国

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公開日: 2014-07-24  

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