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2010 年度 実績報告書

歯根膜由来幹細胞の血管形成誘導遺伝子および細胞内シグナル伝達様式の解明

研究課題

研究課題/領域番号 22791935
研究機関岩手医科大学

研究代表者

大久保 直登  岩手医科大学, 歯学部, ポストドクター (00553207)

キーワード再生医療 / 血管新生 / 間葉系幹細胞 / 歯根膜 / 三次元培養
研究概要

研究実施計画に示していたように、自身で樹立した単一の歯根膜細胞初代培養系から派生した2種類の細胞、1)血管形成能の高い細胞群と2)低い細胞群の血管形成能力の違いに着目し、この2種類の細胞間での遺伝子発現様式についてcDNAマイクロアレイを用いて網羅的に調査を行った。その結果、血管形成能力の高いもののみに優位に発現する遺伝子を"血管形成誘導能力の発現を制御すると思われる候補遺伝子"として選定を行うことに成功した。
その後、マイクロアレイの結果より見出した複数の遺伝子を指標に、1)の細胞群において血管形成にかかわると思われるさまざまな刺激を行った際の各遺伝子の発現を調べた結果、特徴的な発現パターンを示す遺伝子群を見出した。興味深いことに、この遺伝子群の中には、その発現に正または負の相関関係を示すものがあり、現在ウェスタンブロットやリアルタイムPCR法などを用いて確認中である。
さらに、上記においてピックアップしたモデル遺伝子の中から真の血管新生誘導遺伝子をin vitroにおいて絞り込むため、候補とした遺伝子に対するsi RNAを作成し、該当候補遺伝子のノックアウトを行うことにより血管形成が起こらなくなりうるかも現在調査中である。
また、in vitro三次元血管形成誘導モデルにおいても、Tie-2遺伝子の強発現部位(血管形成性細胞)と弱発現部位(非血管形成性細胞)を見出しているが(Okubo.et.al J.Vasc.Res. 2010)、この歯根膜幹細胞による上記の2部位に対するレーザーマイクロダイセクションによる組織サンプルからのmRNAを抽出する作業を進め、さまざまな方法により、"歯根膜由来細胞の血管形成能力を制御する遺伝子"の同定を目指している。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2010

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (3件)

  • [雑誌論文] Vascular cell-like potential of undifferentiated ligament fibroblasts to construct vascular cell-specific marker-positive blood vessel structures in a PI3K activation-dependent manner2010

    • 著者名/発表者名
      Okubo, et.al
    • 雑誌名

      Journal of Vascular Research

      巻: 47 ページ: 369-383

    • 査読あり
  • [学会発表] ラット歯根膜由来未分化間葉系細胞による血管様構造物の形成2010

    • 著者名/発表者名
      大久保直登
    • 学会等名
      第2回『歯のバイオリサイクル医療の革新と海外ビジネス戦略』に係わる中間報告検討会
    • 発表場所
      札幌
    • 年月日
      2010-12-15
  • [学会発表] 歯根膜由来間葉系幹細胞による血管構造形成メカニズムの解明とキー遺伝子の同定2010

    • 著者名/発表者名
      大久保直登
    • 学会等名
      岩手医科大学オープン・リサーチ・プロジェクト発表会
    • 発表場所
      盛岡
    • 年月日
      2010-08-07
  • [学会発表] ラット歯根膜由来未分化間葉系細胞による血管様構造物の形成2010

    • 著者名/発表者名
      大久保直登
    • 学会等名
      岩手医科大学歯学会第70回大会
    • 発表場所
      盛岡
    • 年月日
      2010-07-03

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公開日: 2012-07-19  

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