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1. ゲノムアナライザーを用いた、AID発現により胃上皮にもたらされる遺伝子異常の全体像の探求;AIDを過剰発現する胃上皮細胞において、既知のすべての遺伝子DNAの塩基配列と染色体異常について解析を行い、胃上皮におけるAIDの持続発現の結果生じる遺伝子異常生成・蓄積の全体像を明らかにする。
薬剤誘導により活性化AIDを過剰発現する胃上皮培養細胞株を樹立、またAID Tgマウスの胃組織から胃上皮細胞の初代培養を樹立し、AID過剰発現下の胃上皮細胞における体細胞変異の全体像をゲノムアナライザーを用いて検討する。また、野生型マウスにHP菌を経口感染させることにより、胃上皮細胞に内在性AIDが発現誘導され、遺伝子変異生成に寄与しうるかどうかの検討を行う。
AID過剰発現下の胃上皮培養細胞およびAID Tgマウスの胃から経時的にDNAを抽出する。遺伝子変異の解析については、次世代ゲノムアナライザーを用いることにより、体細胞変異を網羅的に解析することが可能となる。野生型マウスにHP菌を経口感染させる。感染後、経時的に胃上皮から核酸を抽出し、内在性AID転写産物の発現を定量評価すると同時に、全癌関連遺伝子の変異生成の有無をゲノムアナライザーを用いて網羅的に検討したところ、癌関連遺伝子に変異を認めた。一方、AID KOマウスにHP株を感染させても遺伝子変異を認めなかった。すなわち、HP菌感染した胃上皮細胞における遺伝子変異生成が、AID依存性に引き起こされることが示唆された。
2. 胃発癌過程におけるAIDの役割についての胃癌モデルマウスを用いた検討;さまざまな胃癌モデルマウスとAID KOマウスをかけあわせ、胃癌発生の頻度について検討し、胃発癌過程におけるAIDの重要性を明らかにすることを目的とする。現在、マウスの準備中である。
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