核移植クローン技術に基づく免疫応答・疾患発症機構の包括的研究基盤

2024 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 22H00398
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 神沼 修 広島大学, 原爆放射線医科学研究所, 教授 (80342921)
• 研究分担者: 田中 芳彦 福岡歯科大学, 口腔歯学部, 教授 (00398083) ; 八村 敏志 東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 教授 (40238019) ; 廣田 順二 東京科学大学, 生命理工学院, 教授 (60405339) ; 坂口 剛正 広島大学, 医系科学研究科(医), 教授 (70196070) ; 堀 正敏 東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 教授 (70211547) ; 杉浦 一充 藤田医科大学, 医学部, 教授 (70335032) ; 井上 貴美子 国立研究開発法人理化学研究所, バイオリソース研究センター, 専任研究員 (70360500) ; 細見 直永 広島大学, 原爆放射線医科学研究所, 研究員 (70363190) ; 三浦 健人 広島大学, 原爆放射線医科学研究所, 助教 (70802742) ; 一戸 辰夫 広島大学, 原爆放射線医科学研究所, 教授 (80314219)
• 研究期間 (年度): 2022-04-01 – 2026-03-31
• キーワード: T細胞 / クローンマウス / 疾患モデル / ヒト化マウス

研究実績の概要

１）TCRを介する生体現象の解析
抗原特異的T細胞クローンマウス同士または野生型マウスとの交配で得られる各種マウスを用い、胸腺選択、TCR対立遺伝子排除機構、T細胞サブセット分化機構等、の再検証に関連した種々実験に加え、生体内で僅かに出現・存在するTCRの再再構成、dual TCR発現T細胞およびエピトープ間相互作用等の誘導機構や生理的意義の解析を推進している。TCRの再々構成からdual TCR発現T細胞の誕生に至る未知のプロセスと、それを起点とした新たな免疫疾患発症機構が明らかになりつつある。
２）病態解析への応用
各種T細胞クローンマウス由来系統を用い、食物アレルギー／免疫寛容誘導モデルや皮膚疾患モデル等の解析を推進している。前年度、歯周病菌・腸内フローラ等の細菌抗原や自己抗原応答性のT細胞から作製した新たなクローンマウスが交配中に死亡する事故があったが、顕微授精で次世代再生させることに成功した。これら新規クローンマウスを用いた解析を進め、新規病態機構の一端が明らかになりつつある。
３）有用性をさらに高める技術改変と応用
ドナーT細胞調整の際、クローン効率に影響を与えるXist遺伝子の欠損マウスを用いることや、抗体や抗原／MHCテトラマー等で染色・分取して目的細胞を絞り込んで核移植する等、より選択的なクローンマウス作製法の確立に向けた技術改変を継続して進めている。抗原特異的TCR鎖や活性化T細胞の１細胞単位での解析に加え、抗原特異的T細胞の体内動態、活性化レベルの定量比較解析等を行うことに関連した実験も継続している。枯草菌ゲノムベクターを用いたヒトTCRα・β鎖ゲノム全長のクローニングや、ゲノム編集によるMHCノックアウトマウスの作製等も並行して推進し、成果物も得られ始めている。

現在までの達成度

2: おおむね順調に進展している

理由

多くの研究者が相互に協調しながら様々なプロジェクトを進展させている。想定を越える新たな知見や、関連する新規テーマの着想が得られる等、継続的な発展性もある。個々に進捗度の相違はあるものの、ほぼ全ての項目で進展がみられている。

今後の研究の推進方策

基本的には、各プロジェクトの研究推進を継続する。本研究の集大成として、インパクトの大きい論文の投稿に結びつける。必要に応じて、関連の深い構成員同士で新たな協調体制を組む等して、研究進展の迅速化や新たなテーマの発掘に結びつける。

研究成果

• [雑誌論文] Impaired pheromone detection and abnormal sexual behavior in female mice deficient for ancV1R (2025)
  • 著者名/発表者名: Kondo Hiro、Iwata Tetsuo、Sato Koji、Koshiishi Riseru、Suzuki Hikoyu、Murata Ken、Spehr Marc、Touhara Kazushige、Nikaido Masato、Hirota Junji
  • 雑誌名: Current Biology 巻: 35 ページ: 21～35.e8
  • DOI: 10.1016/j.cub.2024.10.077
  • 査読あり
• [雑誌論文] α7 nicotinic acetylcholine receptor agonist attenuates allergen-induced immediate nasal response in murine model of allergic rhinitis (2024)
  • 著者名/発表者名: YAMASHITA Shuhei、MIURA Kento、MATSUURA Anna、YAMASAKI Norimasa、UDA Naoto、OGATA Sawako、HOSOMI Naohisa、NAKAJIMA Shotaro、KITAMURA Noriko、GOTOH Minoru、MORI Akio、KAMINUMA Osamu
  • 雑誌名: Journal of Veterinary Medical Science 巻: 86 ページ: 824～827
  • DOI: 10.1292/jvms.24-0033
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] LAT1:アレルギー性鼻炎治療における新たな標的分子 (2024)
  • 著者名/発表者名: 神沼 修、林 啓太朗、後藤 穣
  • 雑誌名: アレルギーの臨床 巻: 43 ページ: 729-731
• [雑誌論文] Obox4 promotes zygotic genome activation upon loss of Dux (2024)
  • 著者名/発表者名: Guo Youjia、Kitano Tomohiro、Inoue Kimiko、Murano Kensaku、Hirose Michiko、Li Ten D、Sakashita Akihiko、Ishizu Hirotsugu、Ogonuki Narumi、Matoba Shogo、Sato Masayuki、Ogura Atsuo、Siomi Haruhiko
  • 雑誌名: eLife 巻: 13 ページ: e95856
  • DOI: 10.7554/eLife.95856
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] マウスモデルを用いた花粉症の病態解析 (2025)
  • 著者名/発表者名: 神沼 修
  • 学会等名: 神戸医療産業都市推進機構実験動物セミナー
  • 招待講演
• [学会発表] Synergistic downregulation of T cell-dependent steroid-resistant asthma model by costimulatory signal blockade and kinase inhibitors. (2025)
  • 著者名/発表者名: Mori A. Kaminuma O.
  • 学会等名: 2025 AAAAI / WAO Joint Congress
  • 国際学会
• [学会発表] A new model for analyzing T cell receptor repertoire dynamics in relation to radiation and allergen-induced skin inflammation. (2025)
  • 著者名/発表者名: Enkhbaatar U, Miura K, Yamasaki N, Inoue K, Ogura A, Kaminuma O.
  • 学会等名: 9th International Symposium of the Network-type Joint Usage/Research Center for Radiation Disaster Medical Science
  • 国際学会
• [学会発表] Ear thickness-based evaluation of the disease severity in a murine model of systemic sclerosis. (2024)
  • 著者名/発表者名: Mirkatouli F, Yamanaka R, Yamasaki N, Ogata S, Miura K, Kaminuma O.
  • 学会等名: 第53回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] Development of atopic dermatitis-like skin inflammation in CD4+ T cell-cloned mice. (2024)
  • 著者名/発表者名: Enkhbaatar U、三浦健人、山崎憲政、井上貴美子、小倉淳郎、神沼修．
  • 学会等名: 第71回日本実験動物学会総会
• [学会発表] Effects of topical anti-allergy drugs on a murine model of Th17 cell-mediated skin inflammation. (2024)
  • 著者名/発表者名: Mirkatouli F、田尾友記子、三浦健人、Enkhbaatar U、山崎憲政、宇田直人、尾形佐和子、神沼修．
  • 学会等名: 第71回日本実験動物学会総会
• [学会発表] 歯周病原細菌に特異的な免疫応答による歯周病の病態形成機構の解明 (2024)
  • 著者名/発表者名: 永尾 潤一, 中上 昌信, 岸川 咲吏, 豊永 憲司, 加地 英美, 岩沼 青葉, 根来 香奈江[安松], 田崎 園子, 岩井 覚, 田中 芳彦
  • 学会等名: 第66回歯科基礎医学会学術大会
• [学会発表] Candida albicans感染における免疫受容体シグナル関連分子の役割 (2024)
  • 著者名/発表者名: 豊永 憲司, 永尾 潤一, 田崎 園子, 加地 英美, 岸川 咲吏, 中上 昌信, 岩沼 青葉, 根来 香奈江, 田中 芳彦
  • 学会等名: 第66回歯科基礎医学会学術大会
• [学会発表] Th17細胞による口腔カンジダ症の病態制御機構の解明 (2024)
  • 著者名/発表者名: 加地 英美, 豊永 憲司, 田崎 園子, 永尾 潤一, 岸川 咲吏, 中上 昌信, 岩沼 青葉, 田中 芳彦
  • 学会等名: 第66回歯科基礎医学会学術大会
• [学会発表] 核移植技術を用いた異種野生マウス由来ES細胞の樹立 (2024)
  • 著者名/発表者名: 渡邉 奈穂美、廣瀬 美智子、長谷川 歩未、持田 慶司、小倉 淳郎、井上 貴美子
  • 学会等名: 第71回日本実験動物学会総会