本研究においては、脊髄亜半切モデルのマカクザルにおいて、損傷後、上肢の到達把持運動の訓練とともに、大脳皮質運動関連領野に広汎に電気刺激を加えることで、損傷反対側の運動野からの皮質脊髄路が錐体交叉において走行を変化させ、損傷反対側の脊髄を下行し、損傷より尾側で交叉して、損傷側の運動ニューロンなどに結合することを見出した我々の選考研究に基づき、これら大規模可塑性誘導細胞の機能回復への寄与及び、その基盤となる遺伝子ネットワークの変化を解析することを目的としている。そのためにラット、そしてマカクザルにおいて実験を順次行うこととしていた。そのため、実験に用いる大脳皮質の運動野ニューロンのsingle cell RNA sequencingのための条件検討を幼弱ラット、成熟ラット、そして成熟マカクザルの大脳皮質運動野のPBSによる経心的潅流直後に取り出した脳標本に対して行った。幼弱ラットでは当初より高いRIN値(>8)が得られ、問題ないと判断されたが、成熟ラットでは繰り返し、核を取り出す条件検討が必要だったが、一応満足のいく条件が得られるようになった。マカクザルにおいても短時間で取り出し、脳を良い状態で保つための工夫が必要だったが、一応満足の行くレベルでの核の生成プロトコールを決定することができた。 他方、第一段階の実験のためのラットの到達把持運動訓練を開始したが、訓練の手法を調整しているうちに、実際に電極の埋め込みなどの実験を開始する前に基盤Sが採択となり、本研究は終了した。
|