| 研究課題/領域番号 |
22H04996
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| 研究機関 | 公益財団法人がん研究会 |
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研究代表者 |
広田 亨 公益財団法人がん研究会, がん研究所 実験病理部, 部長 (50421368)
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| 研究分担者 |
サンペトラ オルテア 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 講師 (50571113)
伊藤 武彦 東京工業大学, 生命理工学院, 教授 (90501106)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-27 – 2027-03-31
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| キーワード | 染色体不安定性 / 染色体動態 / クロマチン高次構造 / 異数体 / Auroraキナーゼ / がん幹細胞 |
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| 研究実績の概要 |
本年度は、がん幹細胞のDiploids/Parent-likes/Hyperploidsの各クローンの増殖性を解析した。in vitroで培養した各クローンを、14日おきにDNA FISH解析を行い、核型の分布を4か月間追跡したところ、その結果、Diploidは時間が経過しても安定に二倍体の染色体数を維持していた一方で、Parent-likeとHyperploidは、染色体数がさらに増減し、染色体不安定性のレベルが変動することが観察された。このとき同時に各クローンのAurora B活性のレベルを評価するため、Aurora Bキナーゼの基質であるDsn1のリン酸化を定量的に解析した。その結果、Diploidsグループは、親株であるTSと同様なAurora Bの活性を持っていたが、Parent-likesとHyperploidsクローンはTSよりAurora B活性が低いことが分かり、各クローンのCINのレベルをAurora Bの活性がよく反映していることが見出された。さらに、各クローンの細胞をマウス脳に定位同所移植し、形成した腫瘍の核型変化をDNA FISHにより解析した。その結果、いずれのグループもCINレベルが上昇しながらがん細胞が増殖するという結果が得られ、生体内ではAurora Bの活性が低下するメカニズムが存在することが示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
構想の段階では予想にとどまっていた、３つに分類したがん幹細胞クローンの「染色体動態」が、各クローン間でそれぞれの特徴を維持しつつ増殖することを確認できた。このことによって、クローン間での比較問題なくでき、染色体不安定性の違いと関連する細胞表現型の解析を進めることができている。
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| 今後の研究の推進方策 |
がん幹細胞（TS細胞）とそのクローン９系統（Diploids, Parent-likes, Hyperploids各３）について、ゲノムワイドの染色体構造の変化、遺伝子発現プロファイルを調べ、 長期間培養して追跡する試験管内と、マウスの脳実質に同所移植したときの増殖性を解析する。
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