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2023 年度 実施状況報告書

浸透圧ストレスを克服できる生物に幅広く存在する新規なタンパク質の正体の解明と応用

研究課題

研究課題/領域番号 22K05442
研究機関大阪大学

研究代表者

福田 庸太  大阪大学, 大学院薬学研究科, 助教 (20783179)

研究期間 (年度) 2022-04-01 – 2025-03-31
キーワードX線結晶構造解析 / 乾燥耐性
研究実績の概要

本研究の目的は、浸透圧(乾燥)ストレスを克服できる生物に幅広く存在する新規なタンパク質の構造と機能をつまびらかにし、生物界に普遍的に存在するストレス耐性分子基盤に関する知見を得ることである。
昨年度に見出した、厳しい乾燥に耐える生物が共通して有していながら構造及び機能が未知であるタンパク質Aについて、さらなる解析をこころみた。このタンパク質Aは、構造が既知のタンパク質との配列類似性が低いいいっぽうで、多様なドメイン・界の生物にホモログが見つかることがわかっている。また、これを有する生物の中には厳しい乾燥に強いとされる動物や植物、バクテリアが多く存在していることから、タンパク質Aが乾燥耐性に寄与している可能性がある。
本年度は昨年度にタンパク質Aの構造決定に繋がった結晶化条件以外から得られた結晶や変異体の結晶を用いて、X線結晶構造解析により、活性中心構造の異なる複数の立体構造を決定した。また、昨年度見出した本タンパク質の脱リン酸化活性についてさらに広範な基質スクリーニングをするとともに、タンパク質Aとアミノ酸配列類似性を示す放射線耐性細菌由来タンパク質Bについても脱リン酸化活性を測定した。タンパク質Bはタンパク質Aと同じく、脱リン酸化活性を示した。植物由来のホモログタンパク質の組換え体発現も植物や大腸菌を用いて試みているが、MBPタグ付きのものが大腸菌からわずかに得られているのみである。
クマムシ由来タンパク質Aについて得られた結果をまとめ、現在論文投稿中である。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

乾燥ストレスを克服できる生物に幅広く存在する新規なタンパク質の構造と機能の解析について一定の成果を得られており、論文を投稿中のため。

今後の研究の推進方策

進捗状況に示したタンパク質Aの植物ホモログについて発現・精製条件について引き続き検討する。また、タンパク質Aと同様に「浸透圧ストレスを克服できる生物に幅広く存在する新規なタンパク質」が他にも数多く見つかっているため、これらの構造機能解析を進める。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2023

すべて 学会発表 (3件) (うち国際学会 1件)

  • [学会発表] A new enzyme from anhydrobiotic tardigrades2023

    • 著者名/発表者名
      Subaru Kato, Yohta Fukuda, Masanori Obana, Yasushi Fujio, Tsuyoshi Inoue
    • 学会等名
      26TH CONGRESS AND GENERAL ASSEMBLY OF THE INTERNATIONAL UNION OF CRYSTALLOGRAPHY (IUCr2023)
    • 国際学会
  • [学会発表] A new phosphatase from anhydrobiotic tardigrades2023

    • 著者名/発表者名
      Subaru Kato, Yohta Fukuda, Masanori Obana, Yasushi Fujio, Tsuyoshi Inoue
    • 学会等名
      第96回日本生化学大会
  • [学会発表] 乾燥耐性植物由来PCC13-62の新規酵素活性2023

    • 著者名/発表者名
      出口皓基、加藤澄晴、藤田健太郎、福田庸太、井上豪
    • 学会等名
      第96回日本生化学大会

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公開日: 2024-12-25  

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