| 研究課題/領域番号 |
22K05581
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| 研究機関 | 東北大学 |
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研究代表者 |
高田 美信 東北大学, 生命科学研究科, 技術専門職員 (30451610)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| キーワード | アブラナ科植物 / 自家不和合性 / 一側性不和合性 / 花粉・柱頭情報伝達 / 受粉時不和合性 |
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| 研究実績の概要 |
アブラナ科植物Brassica rapa集団の自殖による近交系統育成とその総当たり交配試験の結果からこれまでに報告の無い、新規な交一側性不和合性組合せ(UIb)を見出し、その原因遺伝子解明を行っている。これまでの研究で遺伝学的にUIbの♂側、♀側の両候補遺伝子が代表者自身で以前に単離した日本とトルコ由来系統間で起こる一側性不和合性(UI)の原因遺伝子座と同一である可能性を示す結果を得られている。そこで、UIbの♀側系統S27が持つSUI1アレルであるSUI1-3をB. rapaに遺伝子導入した結果、現在までに3個体の形質転換体が得られている。最終年度に形質転換体の表現型し、UIb柱頭側形質を導入することができるかどうか検討する。 花粉側因子については、候補遺伝子である並列に3つの重複が見られるPUI1遺伝子の簡易的な発現解析と多型解析を行ったところ、3つ重複PUI1遺伝子のうち、一つは開始コドン後4bpにstopコドンを生じる変異が存在していること、もう一つは葯内での発現量が低いという結果を得た。これらにより、3つのPUI1重複遺伝
子のうち、PUI1-4と名付けた遺伝子がUIbの花粉側原因因子ではないかと推察した。本年度は、PUI1-4の形質転換実験を開始した。最終年度にその形質を確認する。また、これまでに単離しているPUI1のアレル情報、遺伝子重複情報をもとに、PUI1アレルの単独機能が特異的なSUI1との結合を生む可能性が考えられたため、PUI1アレル6種類を外的に導入した個体の作成、と内在するPUI1配列へのゲノム編集を開始した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
概要で述べた通り、詳細なマッピングと多型解析ならびに発現解析の結果から、新規な受粉時不和合性(一側性不和合性)組合せを支配する柱頭側・花粉側の両因
子候補を単離するに至っている。また、柱頭側因子に関しては遺伝子導入実験を開始しており、花粉側候補因子についても23年度より開始する予定である。当初
予定では遺伝子導入による原因遺伝子の機能証明を23年度内に開始するとしていたことから、計画以上に進展していると評価した。
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| 今後の研究の推進方策 |
作出済みの形質転換植物を用いて、UIb形質が付与されるかどうかを確認する。これら実験の際には、UI形質と自家不和合性形質を厳密にコントロールした系統を使用する必要があるが、既に複数のS遺伝子型背景のUI系統を育成済みであり、問題は生じないと思われる。花粉側因子については、PUI1-4を第一候補遺伝子としているが、ゲノム中に存在しているPUI1-3遺伝子も依然として候補の一つであるため、今後得られる予定のPUI1アレル形質転換個体の花粉側不和合性形質を大規模に調査する。
近年、細胞膜上でのリガンド受容体とそのシグナル伝達機構研究において、大きな成果を見せているベンサミアナタバコでの一過的発現とsplit-Luciferaseを用いて、SUI1の細胞内での結合解析を開始し、既に遺伝学的に明らかにしていた自家不和合性関連因子とSUI1の結合を確認している。今後、PUI1ペプチド添加時の結合強度等を調査する予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
昨年度実績報告書内で報告済みであるが、異常気象などの環境条件の影響で予定していた次世代シークエンス用サンプル調整が困難になったこともあり、昨年度からの繰越し金額が非常に高額となってしまったため。
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