| 研究課題/領域番号 |
22K06982
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
松田 勝也 長崎大学, 原爆後障害医療研究所, 准教授 (20380967)
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| 研究分担者 |
吉浦 孝一郎 長崎大学, 原爆後障害医療研究所, 教授 (00304931)
中島 正洋 長崎大学, 原爆後障害医療研究所, 教授 (50284683)
光武 範吏 長崎大学, 原爆後障害医療研究所, 教授 (50404215)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2026-03-31
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| キーワード | 甲状腺 / 濾胞性腫瘍 / 術前診断 / 細胞診 / 53BP1 / ゲノム不安定性 / DNA損傷応答 |
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| 研究実績の概要 |
【目的】本研究では、術前の穿刺吸引細胞診（液状化細胞診）検体における53BP1発現型解析結果と甲状腺濾胞性腫瘍診断の関連性を明らかにする。さらに各症例毎の遺伝子変異の特徴と53BP1発現型との関係を解明する。特にDNA損傷応答関連分子の遺伝子異常との関係を明らかにすることで、53BP1発現異常の誘導機序を考察する。
【方法】臨床的に濾胞性腫瘍が疑われ採取された穿刺吸引細胞診検体（細胞診実施後の残余検体）を収集し、盲検的前向き解析を行う。
53BP1発現型解析：細胞診用固定液に保存された検体を用いて、53BP1とKi-67による蛍光二重免疫細胞化学を実施し、画像解析ソフトにより定量的に解析する。53BP1発現型と術後病理診断結果とを突合し、分類された各パターンに最適な重み付け（係数）を決定するため、ロジスティック回帰モデルを用い、最適な診断予測モデルを構築し、診断精度を算出する。
遺伝子解析：核酸保存液に保存された検体を用いる。核酸抽出キットを用いてDNAとRNAを抽出し品質確認後、キャプチャーシークエンス法による遺伝子変異解析を行う。遺伝子解析には、甲状腺癌の診断に有用とされるドライバー遺伝子のうち特に検出率の高い20種の遺伝子に加えて、発がんへの関与が知られているDNA損傷応答関連遺伝子を含むオーダーメイドのがん遺伝子パネルを用いる。
これまでに甲状腺濾胞性腫瘍が疑われ手術が施行された65症例の穿刺吸引細胞診検体を収集し、53BP1とKi-67による蛍光二重免疫細胞化学を実施し解析を進めている。同時に核酸抽出も進めており、遺伝子解析可能な核酸が抽出できることを確認している。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
検体収集、53BP1発現型解析、核酸抽出が順調に進んでいる。
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| 今後の研究の推進方策 |
これまでに集積した細胞診検体は甲状腺良性腫瘍が多かったため、今後は特に濾胞癌の集積を進めて5解析を進める。さらに甲状腺癌あるいはDNA損傷応答関連遺伝子を含む独自の遺伝子パネル解析に着手し、53BP1発現型と遺伝子異常との関連性について解析する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本年度の実験は、本教室既存の消耗品や試薬を使用したため、これらに係る経費を削減できた。今後、がん遺伝子パネル解析に必要な試薬の購入に充てる予定である。
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