| 研究課題/領域番号 |
22K07846
|
|---|
| 研究機関 | 香川大学 |
|---|
研究代表者 |
三木 崇範 香川大学, 医学部, 教授 (30274294)
|
|---|
| 研究分担者 |
太田 健一 香川大学, 医学部, 助教 (50403720)
鈴木 辰吾 香川大学, 医学部, 准教授 (50451430)
横山 俊史 神戸大学, 農学研究科, 助教 (10380156)
割田 克彦 鳥取大学, 農学部, 教授 (40452669)
石川 一朗 香川大学, 医学部附属病院, 講師 (90870098)
金西 賢治 香川大学, 医学部, 教授 (10263906)
日下 隆 香川大学, 医学部, 教授 (50274288)
大給 日香里 香川大学, 医学部, 助教 (50909611)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2026-03-31
|
| キーワード | 母体炎症 / 脳腸相関 / 脳内炎症 / 炎症性サイトカイン |
|---|
| 研究実績の概要 |
妊娠後期の母体感染による炎症が胎児の脳発達に及ぼす影響に関して、リポポリサッカライド(LPS)投与による妊娠炎症曝露モデルを用いた検討を行った。前年度に引き続き慎重な投与濃度の検討を行った結果、母体が炎症による疼痛に苦しむ事無くかつ仔への出生時の体重減少が認められた100 ug/kg b.w.を投与濃度とし、妊娠18及び19日目に腹腔内投与を行って妊娠炎症曝露モデルを作製した（対照群には溶媒：リン酸緩衝液[PBS]を同様の期間・方法で投与）。また更に妊娠中の炎症が仔に直接的に与える影響に加えて、その炎症が母獣自体に与える影響（腸内細菌叢の変化やそれに伴う養育行動の変化など）も考慮するために、出生後に仔を各群で入れ換えた。具体的には妊娠中/養育中で母獣がPBS/PBS、PBS/LPS、LPS/PBS、LPS/LPSとなるように生後1日目に仔を入れ替えて4群を作製した。LPS/PBSで妊娠中の炎症による仔への直接的な影響、PBS/LPS群で妊娠中に炎症を起こした母獣の変化が仔に与える影響、LPS/LPS群でその両方が重ね合わさった場合の影響を比較検討する。生後1日目の体重は妊娠中にLPSを投与した群で有意に低かったが、離乳後には体重差は無くなっていることからこれは一過性の影響であったと考えられる。現在は、これらの仔が育つのを待っている段階であり、2024年度上半期にはこれら仔を用いてヒト学童期に相当する時期である5週齢で脳採取を行い、脳発達に与える影響を検討する。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
前年度に決定した濃度で投与した際に、仔の体重に殆ど影響が無く投与が確実に行われたか等の判断が困難であると判断した。妊娠後期の投与モデルの報告例は非常に少ないことからまず投与の確実性を重視するため投与濃度を再検討して、少し増やした100 ug/kg b.w.に決定した。この検討を行う必要があったため予定よりも研究計画は大幅に遅れているが、投与が確実に行われいることを出生時体重で確認できるようになり、今後の研究の信頼性を高める事ができるはずである。また既に決定したリポポリサッカライド濃度を用いた妊娠炎症曝露モデルの作製は行われており、5週齢になるまで飼育している状態にある。更にこの後に予定している脳の組織学的に関しては抗体の用意や予備実験は既に完了しているため、脳採取後は円滑に研究を進め、遅れを取り戻す事は十分可能である。
|
| 今後の研究の推進方策 |
現在既に作製・飼育中の妊娠炎症曝露モデルの脳を採取し、妊娠中の炎症が仔の脳発達に中期的に与える影響について解析を行う。2024年度はヒト学童期に相当する脳発達段階として5週齢で脳を採取し、その時期に最も神経可塑性が高い状態：臨界期とされる内側前頭前皮質に焦点を当てて解析を行う予定である。更に、血液及び糞便を同時に回収し血中サイトカインや腸内細菌叢の変化も同時に解析することで、妊娠中の炎症が仔にどのような影響を与えうるのかを脳腸相関に焦点を当てて評価する。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
前述の通り、研究の精度を踏まえて再度投与量の検討を妊娠ラットを用いて行ったため研究が遅れ次年度使用額が生じている。既に投与量の検討を終えモデルの作製も行っている段階にある事、そのモデルの各解析に必要な予備実験は完了している事を踏まえると、次年度には前年度行えなかった分を含めた様々な解析が必要となり、それに必要な試薬の購入費や次世代シークエンスの受託研究費等として次年度使用額も含めて使用し研究を進める予定である。
|
