ヒト歯髄幹細胞培養上清による炎症性腸疾患の腸管上皮機能も修復する新規治療法の開発

2023 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 22K08018
• 研究機関: 東京医科大学
• 研究代表者: 大脇 敏之 東京医科大学, 医学部, 客員准教授 (70453834)
• 研究分担者: 善本 隆之 東京医科大学, 医学部, 教授 (80202406)
• 研究期間 (年度): 2022-04-01 – 2024-03-31
• キーワード: 歯髄幹細胞 / 培養上清 / 炎症性腸疾患

研究実績の概要

2023年度は、炎症性腸疾患のモデルマウスであるデキストラン硫酸ナトリウム（DSS）誘導性腸炎マウスにおける不死化歯髄幹細胞培養上清（SHED-CM）の治療効果の作用機序について検討を行う予定であった。
① ヒト腸管バリアの腸管上皮in vitroモデルとして、ヒト結腸癌由来細胞CaCo2の培養細胞をTNF-aで刺激し、SHED-CM　の存在下および非存在下でデスモグレイン2（DSG2）の発現、経上皮電気抵抗の測定、透過した蛍光標識デキストランの蛍光強度を測定、上清中の分子の関与を複数の中和抗体を用いて検討する予定であった。CaCo2細胞をSHED-CMで刺激すると、DSG2発現が上昇する傾向が見られた。
② 免疫抑制の作用機序としては、DSS水7日間と通常の水道水3日間飲水後、粘膜固有層リンパ球を取り出し、細胞分布や免疫抑制に関わる制御性T細胞（Treg）、IL-10産生制御性T細胞Tr1、骨髄由来抑制細胞、M1/M2マクロファージの比率についてFACS解析を行った。SHED-CM投与により、Foxp3+CD25+CD4+Tregや骨髄由来抑制細胞（MDSC）が増加する傾向が見られた。
以上の結果より、SHED-CMによる免疫抑制の誘導にTregとMDSCの関与と腸管粘膜の修復の可能性が示唆されたが、今後、それらの再現性とSHED-CM中のどの分子がそれらの誘導に関与しているかを示す必要がある。

研究成果

• [雑誌論文] A promising needle-free pyro-drive jet injector for augmentation of immunity by intradermal injection as a physical adjuvant. (2023)
  • 著者名/発表者名: Sonoda J, Mizoguchi I, Inou S, Watanabe A, Sekine A, Yamagishi M, Miyakawa S, Yamaguchi N, Horio E, Katahira Y, Hasegawa H, Hasegawa T, Yamashita K, Yoshimoto T.
  • 雑誌名: Int J Mol Sci. 巻: 24(10) ページ: 9094
  • DOI: 10.3390/ijms24109094
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Conditioned medium of immortalized stem cells from human exfoliated deciduous teeth inhibit melanogenesis by suppressing Wnt signaling via Wnt5a. (2023)
  • 著者名/発表者名: Inoue S, Sekine A, Katahira Y, Yamagishi M, Sonoda J, Watanabe A, Miyakawa S, Hasegawa H, Mizoguchi I, Yoshimoto T.
  • 学会等名: JSICR/MMCB 2023 Joint Symposium