| 研究課題/領域番号 |
22K08078
|
|---|
| 研究機関 | 香川大学 |
|---|
研究代表者 |
正木 勉 香川大学, 医学部, 教授 (30335848)
|
|---|
| 研究分担者 |
小原 英幹 香川大学, 医学部附属病院, 講師 (10612476)
岩間 久和 香川大学, 医学部, 准教授 (20398035)
仁木 敏朗 香川大学, 医学部, 助教 (40558508)
田所 智子 香川大学, 医学部附属病院, 助教 (50813177)
森下 朝洋 香川大学, 医学部附属病院, 講師 (60423430)
大浦 杏子 香川大学, 医学部附属病院, 助教 (80834639)
谷 丈二 香川大学, 医学部, 助教 (00596075)
中原 麻衣 香川大学, 医学部附属病院, 病院助教 (00865610)
藤田 浩二 香川大学, 医学部附属病院, 助教 (50749421)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
|
| キーワード | エピガロカテキンガレート / 肝細胞癌 / 抗がん作用 / 分子標的治療薬 / 耐性株 |
|---|
| 研究実績の概要 |
緑茶に含まれるエピガロカテキンガレート（以下：EGCG）は疫学的に癌の発生予防効果が報告されており、ある種の癌細胞の抑制効果も報告されている。しかしながら肝癌の分子標的治療薬Lenvatinib、Sorafenib耐性癌細胞株に対するEGCGの効果は明らかではない。そのような耐性癌細胞を含む肝癌細胞株におけるEGCGの抗腫瘍効果について基礎的解析をした。
【方法】（１）2種類の肝癌細胞株HuH-7、Hep3Bを用いて培養液中にLenvatinib、Sorafenibの濃度を1μMから10μMまで添加した。生存細胞のみをセレクションし、耐性肝癌細胞株を作成しIC50値の薬剤濃度を確認した。（２）耐性株におけるEGCGの細胞増殖抑制効果をMTT assayで解析した。（３）EGCGの抗腫瘍作用の効果に関連するmicroRNAを2563遺伝子が搭載されたアレイチップを用い網羅的に解析した。さらにLenvatinib、Sorafenib耐性肝癌細胞株Hep3Bをヌードマウスの皮下に移植し、EGCGを腹腔内に投与し、抗腫瘍効果を検討した。
【成績】Hep3Bの野生株及びLenvatinib耐性株における48時間後のIC50値はそれぞ4.0μM、92.7μMであった。またHep3Bの野生株及びSorafenib耐性株ではそれぞれ2.0μM、11.4μMであり、それぞれの薬剤の耐性株を樹立した。Hep3B全ての細胞株においてEGCGの濃度依存的に細胞増殖抑制効果を示した。しかしながらHuH-7においては効果を示さなかった。また、EGCG投与前後にHep3BのmicroRNAは明瞭なクラスターを形成し、EGCG投与により抗腫瘍効果に関連するmicroRNA分子を見いだした。In vivoの解析においてもLenvatinib、Sorafenib耐性株に対する抗腫瘍効果を示した。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
1: 当初の計画以上に進展している
理由
この一年で、予定以上の研究成果を出すことができた。今は、得られた結果の部分EGCGにおける、肝癌細胞株の抑制を論文にまとめていく段階になっている。
2種類の肝癌細胞株HuH-7、Hep3Bを用いて培養液中にLenvatinib、Sorafenibの耐性株を作成できた。耐性株におけるEGCGの細胞増殖抑制効果をin vitro, in vivoで解析したところ、Hh7には、癌抑制効果見られなかったが、Hep3Bには、癌細胞抑制効果が見られた。
また、EGCG投与前後にHep3BのmicroRNAは明瞭なクラスターを形成し、EGCG投与により抗腫瘍効果に関連するmicroRNA分子を見いだした。ほぼ、予定より、早く進行している。
|
| 今後の研究の推進方策 |
エピガロカテキンガレート（以下：EGCG）は疫学的に癌の発とガレクチン9の併用における抗腫瘍効果を解析する。肝癌の分子標的治療薬Lenvatinib、Sorafenib耐性癌細胞株に対するEGCGとガレクチン９の上乗せ癌抑制効果をin vitro, in vivoで解析する。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
実験が予想以上に進行しており、実験を行うよりまとめ作業に入っていたため未使用額が生じた。
令和5年度はエッペンドルフチューブに使用していく予定。
|
