| 研究課題/領域番号 |
22K08469
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| 研究機関 | 独立行政法人国立病院機構九州医療センター(臨床研究センター) |
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研究代表者 |
高嶋 秀一郎 独立行政法人国立病院機構九州医療センター(臨床研究センター), その他部局等, 血液内科医師 (70622116)
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| 研究分担者 |
菊繁 吉謙 九州大学, 大学病院, 講師 (40619706)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| キーワード | GVHD / 同種造血幹細胞移植 / 腸管オルガノイド / IFN-gamma / MYC / STAT1 |
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| 研究実績の概要 |
先行研究の腸管オルガノイドを使用した実験でインターフェロンガンマ（IFNg）による腸管上皮の増殖促進効果が腸管上皮のSTAT1発現とMycの発現誘導に依存していることが明らかになっていた。我々はSTAT1とMycの関連について探索するため腸管上皮細胞特異的なStat1欠損マウスとそのコントロールマウスから小腸の腸管オルガノイドを作成し、IFNgを加えてオルガノイドの遺伝子発現をreal time PCR法で評価した。その結果、Myc遺伝子の発現がStat1依存性に亢進することがわかり、さらに腸幹細胞の細胞周期の制御に重要でMycの標的遺伝子でもあるCcnd1の発現亢進もStat１依存性にみられた。この結果はIFNgによる腸管上皮の増殖はIFNg→STAT1→MYC→CCND1の経路に従って生じることを示唆する。
さらに先行研究では何の処置もしていないNaiveマウスやGVHDを発症しない同系移植後のマウスと比較して同種移植後にGVHDを発症したレシピエントマウスで腸管上皮のうち、増殖が盛んな陰窩領域にc-Mycの発現向上を認めた。このc-Mycの誘導もSTAT1に依存するかどうかを検証するため腸管上皮細胞特異的なStat1欠損マウスをレシピエントとして移植実験を実施した。同種移植後の陰窩領域のc-Mycの発現亢進はStat1欠損マウスでは認められず、Stat１依存性であることが明らかになった。これはStat1がIFNgのシグナル伝達に不可欠なことを考えるとマウス腸管上皮で細胞増殖に関連したIFNg-Stat1-Mycのシグナル伝達経路が存在することを示唆する結果と考えられる。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本研究課題で検証すべき仮説として設定した腸管上皮細胞におけるIFNg-Stat1-Mycのシグナル伝達経路の増殖刺激効果についてマウス腸管オルガノイドにおいてほぼ明らかにすることができた。今後はStat1が直接的にMycの発現を亢進させているかどうかの検証を行う予定である。またGVHD発症マウスの腸管上皮、特に細胞増殖が盛んな陰窩領域に認められたc-Mycの発現亢進にStat1に依存することを明らかにできた。これは腸管オルガノイドを用いたin vitroの実験結果とも一致している。今後の検証ではGVHD発症マウスの腸管上皮におけるc-Mycの機能的な役割の解明が待たれる。
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| 今後の研究の推進方策 |
腸管オルガノイドを用いて腸管上皮でIFNg-Stat1-Mycの関連についてさらに詳細なシグナル伝達経路の解析を行う。具体的にはこれまであまり明らかにされていないStat1によるMycの発現亢進についてそのメカニズムの解明を目指す。
また、GVHDを発症したマウスの腸管上皮におけるMycの機能的な解析をすすめる。具体的にはMycの半欠失マウスを使用する予定であるが、同マウスの作成が遅延しているため代替手段として選択的Myc阻害剤の全身投与を行ってその効果を検証する方法も検討中である。
ヒト臨床検体を用いた解析については引き続き、検体の収集を進める。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本研究課題については使用期限の関係から他の研究費助成を優先して使用しため次年度使用額が生じた。次年度については次年度使用額の使用を見込んでマウスの購入や維持、研究試薬の購入などを計画しており研究期間として設定した3年間を通して予定通りの研究費を要する見込みである。
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