治癒を目指したCML幹細胞の特性解析

2022 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 22K08490
• 研究機関: 近畿大学
• 研究代表者: 松村 到 近畿大学, 医学部, 教授 (00294083)
• 研究分担者: 田中 宏和 近畿大学, 医学部, 准教授 (40360846) ; 口分田 貴裕 近畿大学, 医学部, 講師 (70580603) ; 森田 泰慶 近畿大学, 医学部, 講師 (80411594)
• 研究期間 (年度): 2022-04-01 – 2025-03-31
• キーワード: 慢性骨髄性白血病 / 微小残存病変 / 腫瘍免疫

研究実績の概要

本研究では、チロシンキナーゼ（TKI）投与中あるいは中止後の慢性骨髄性白血病(CML)症例に検出される微小残存BCR-ABL mRNAやDNAの由来を解析することで、より適切なモニタリングや治療方針の決定のための分子病態を明らかにする。また、CML幹細胞が残存している場合には、その特性を明らかにし、新たな治療法の開発につなげることを目的としている。
まず、本年度は初発時およびABL-TKI投与3, 6, 12, 24ヶ月後の患者骨髄における、申請者らが同定したCML幹細胞集団（CD34+38-120a+225+細胞, LSC)の割合を算出し、TKI別にその変化を解析した。TKIの種類に関わらず、LSCの割合はBCR-ABL mRNAの発現変化と同様に、TKI投与3ヶ月後までの急速な減少、以降の緩徐な減少の2相に別れた。第二世代TKIであるdasatinib, nilotinib, bostinib投与例では、第一世代TKIであるimatinib投与例と比較して、１相においてよりLSCの割合が低下し、2相の減少もより顕著であった。一部には１相の減少後、ほぼ一定の割合を推移する症例も存在した。LSC, HSCにおける抗腫瘍免疫に関わる免疫チェックポイント分子の発現を網羅的に比較した結果、CD274 (PDL1)の他, CD155 (TIGIT), CD270 (TNFSFR14), GAL9等の抗腫瘍免疫の抑制性分子の発現が、HSCと比較してLSCにおいて有意に高いことを見出した。さらにそれぞれ初発時よりもTKI投与中により強く発現を認めた。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

本年度は、生体内に残存するCML幹細胞のTKI投与中の割合の変化について、また抗腫瘍免疫回避機構について、CML幹細胞集団に発現する免疫チェックポイント分子の発現解析を行なった。その結果、LSC割合の減衰はTKIの世代により差はあるもののいずれも2相性であること、一部の症例では一定の割合で減少することなく推移することが明らかとなった。さらに、LSCに発現する免疫チェックポイント分子は、TKI投与により発現が上昇しており、TKI投与中の生体内での維持に強く関わっている可能性が示唆された。我々の研究を通して、抗腫瘍免疫を標的としたCMLに対する治療戦略として、TKIと複数の免疫チェックポイント分子に対する阻害薬の有用性、さらに免疫チェックポイント分子の発現制御機構の解明の重要性が示唆されたことから、ほぼ当初の目標通りに研究を遂行できていると考えられる。

今後の研究の推進方策

現在、TKI投与後残存しているLSCを用いてRNAシーケンスを実施しており、正常造血幹細胞（CD34+38-120a-225-細胞）と比較することでその特性につき解析する。さらに令和5年度は、TKI投与中あるいは中止後のCML症例に検出される微小残存BCR-ABL mRNAやDNAがCML幹細胞に由来するものか、寿命の長いBリンパ球やTリンパ球に発現するものかを明らかにする。さらに、CML幹細胞におけるCD120a/NF-κB経路の役割、免疫チェックポイント分子の発現制御機構、IDO1の発現変化についての解析も行い、抗腫瘍免疫を介したCML幹細胞を駆逐するための新規治療法の開発を目指す。

次年度使用額が生じた理由

本年度分は、主に試薬の購入に充当する費用として算出していたが、予定よりも少額に収まったため、次年度に繰り越すこととした。
次年度の試薬、抗体、実験動物等に研究費を使用する予定である。
また国内、国外の学会における旅費、論文投稿料にも使用する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Chlorpromazine cooperatively induces apoptosis with tyrosine kinase inhibitors in EGFR-mutated lung cancer cell lines and restores the sensitivity to gefitinib in T790M-harboring resistant cells (2022)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara Ryosuke、Taniguchi Yasuhiro、Rai Shinya、Iwata Yoshio、Fujii Aki、Fujimoto Ko、Kumode Takahiro、Serizawa Kentaro、Morita Yasuyoshi、Espinoza J. Luis、Tanaka Hirokazu、Hanamoto Hitoshi、Matsumura Itaru
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 626 ページ: 156～166
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2022.08.010
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bosutinib in Japanese patients with newly diagnosed chronic-phase chronic myeloid leukemia: final 3-year follow-up results of a phase 2 study (2022)
  • 著者名/発表者名: Ono Takaaki、Hino Masayuki、Matsumura Itaru、Fujisawa Shin、Ishizawa Kenichi、Sakaida Emiko、Sekiguchi Naohiro、Ono Chiho、Aizawa Mana、Tanetsugu Yusuke、Koide Yuichiro、Takahashi Naoto
  • 雑誌名: International Journal of Hematology 巻: 116 ページ: 871～882
  • DOI: 10.1007/s12185-022-03435-4
  • 査読あり
• [雑誌論文] Decision Analysis for Unrelated Bone Marrow Transplantation or Immediate Cord Blood Transplantation for Patients with Philadelphia Chromosome-Negative Acute Lymphoblastic Leukemia in First Complete Remission (2022)
  • 著者名/発表者名: Kako S, Hayakawa F, Miyamura K, Tanaka J, Imai K, Kanda J, Morishima S, Uchida N, Doki N, Ikegame K, Ozawa Y, Takada S, Usui N, Ohtake S, Kiyoi H, Matsumura I, Miyazaki Y, Ichinohe T, Fukuda T, Atsuta Y, Kanda Y.
  • 雑誌名: Transplantation and Cellular Therapy 巻: 28 ページ: 161.e1～161.e10
  • DOI: 10.1016/j.jtct.2021.11.021
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinical outcomes of second‐generation tyrosine kinase inhibitors versus imatinib in older patients with CML (2022)
  • 著者名/発表者名: Ono Takaaki、Takahashi Naoto、Kizaki Masahiro、Kawaguchi Tatsuya、Suzuki Ritsuro、Yamamoto Kazuhito、Ohnishi Kazunori、Naoe Tomoki、Matsumura Itaru
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: 114 ページ: 995～1006
  • DOI: 10.1111/cas.15642
  • 査読あり
• [雑誌論文] Two novel high-risk adult B-cell acute lymphoblastic leukemia subtypes with high expression of CDX2 and IDH1/2 mutations (2022)
  • 著者名/発表者名: Yasuda T, Sanada M, Kawazu M, Kojima S, Tsuzuki S, Ueno H, Iwamoto E, Iijima-Yamashita Y, Yamada T, Kanamori T, Nishimura R, Kuwatsuka Y, Takada S, Tanaka M, Ota S, Dobashi N, Yamazaki E, Hirose A, Murayama T, Sumi M, Sato S, Tange N, Nakamura Y, Katsuoka Y, Sakaida E, Kawamata T, Iida H, Matsumura I, et al.
  • 雑誌名: Blood 巻: 139 ページ: 1850～1862
  • DOI: 10.1182/blood.2021011921
  • 査読あり
• [雑誌論文] CD34+ myeloma cells with self-renewal activities are therapy-resistant and persist as MRD in cell cycle quiescence (2022)
  • 著者名/発表者名: Serizawa Kentaro、Tanaka Hirokazu、Ueda Takeshi、Fukui Ayano、Kakutani Hiroaki、Taniguchi Takahide、Inoue Hiroaki、Kumode Takahiro、Taniguchi Yasuhiro、Rai Shinya、Hirase Chikara、Morita Yasuyoshi、Espinoza J. Luis、Tatsumi Yoichi、Ashida Takashi、Matsumura Itaru
  • 雑誌名: International Journal of Hematology 巻: 115 ページ: 336～349
  • DOI: 10.1007/s12185-021-03261-0
  • 査読あり
• [雑誌論文] C-type lectin-like receptor 2 specifies a functionally distinct subpopulation within phenotypically defined hematopoietic stem cell population that contribute to emergent megakaryopoiesis (2022)
  • 著者名/発表者名: Kumode Takahiro、Tanaka Hirokazu、Esipinoza Jorge Luis、Rai Shinya、Taniguchi Yasuhiro、Fujiwara Ryosuke、Sano Keigo、Serizawa Kentaro、Iwata Yoshio、Morita Yasuyoshi、Matsumura Itaru
  • 雑誌名: International Journal of Hematology 巻: 115 ページ: 310～321
  • DOI: 10.1007/s12185-021-03220-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional inhibition of MEF2 by C/EBP is a possible mechanism of leukemia development by CEBP-IGH fusion gene (2022)
  • 著者名/発表者名: Odaira Koya、Yasuda Takahiko、Okada Kentaro、Shimooka Takuya、Kojima Yukino、Noura Mina、Tamura Shogo、Kurahashi Shingo、Iwamoto Eisuke、Sanada Masashi、Matsumura Itaru、Miyazaki Yasushi、Kojima Tetsuhito、Kiyoi Hitoshi、Tsuzuki Shinobu、Hayakawa Fumihiko
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: 114 ページ: 781～792
  • DOI: 10.1111/cas.15641
  • 査読あり
• [学会発表] Immune analyses of each TKI discontinuation trials leads the differences of immune induction ability (2022)
  • 著者名/発表者名: 高橋 直人、西川 博嘉、大竹 茂樹、熱田 由子、南 陽介、入山 規良、清井 仁、宮崎 泰司、松村 到
  • 学会等名: 第84日本血液学会学術集会
• [学会発表] The clinical outcomes and usefulness of new regimens predicted by simplified frailty scale in RRMM (2022)
  • 著者名/発表者名: 田中 宏和、三宅 義昭、波江野 高大、井上 舞子、藤本 昂、藤井 晶、角谷 宏明、源 周治、口分田 貴裕、谷口 康博、森田 泰慶、辰巳 陽一、芦田 隆司、松村 到
  • 学会等名: 第84日本血液学会学術集会