抗MDA5抗体陽性皮膚筋炎合併間質性肺炎モデルマウスの構築と病態機序の探究

2022 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 22K08521
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 中嶋 蘭 (笹井蘭) 京都大学, 医学研究科, 助教 (10599525)
• 研究分担者: 佐藤 篤靖 京都大学, 医学研究科, 講師 (30706677) ; 橋本 求 大阪公立大学, 大学院医学研究科, 教授 (60512845)
• 研究期間 (年度): 2022-04-01 – 2025-03-31
• キーワード: 間質性肺炎 / 皮膚筋炎 / 抗MDA5抗体 / モデルマウス

研究実績の概要

抗MDA5(CADM-140)抗体陽性皮膚筋炎(DM)は、多発性筋炎/皮膚筋炎(PM/DM)の中でも最も予後不良な一群であり、治療抵抗性の急速進行性間質性肺炎（RP-ILD）を高率に合併し短期間で死亡する率が高い。本疾患には多剤併用による強力な免疫抑制治療を行うことで救命率が改善しうるが、未だ救命率は十分ではなく、新しい治療法の開発が望まれている。しかし、本疾患の治療法開発の障壁となっているのが、適切なモデルマウスが未だ存在しないということである。そこで、抗MDA5抗体陽性ILDモデルマウスを構築するため、ヒトにおける病態で認めれる①Ⅰ型インターフェロン(IFN)の亢進、②間質性肺炎③抗MDA5抗体産生、の３つの条件を満たすモデルマウスの樹立を目的とした。
方法はC57BL/6（B6マウス）、B6/SKGマウス、B6.Foxp3 DTRマウスを対象に、polyI:Cの慢性反復刺激（皮下注射/吸入）を行い、interferonopathyを慢性に惹起しつつ、自己免疫背景のあるマウスにおいて自己抗体産生が誘導されるかを検証した。
polyI:Cの反復吸入によりいずれのマウス種においても急性の肺障害を認めたがB6/SKGマウスでは刺激終了1週間後も線維化を伴う肺障害が残存した。一方、抗MDA5抗体の産生については一部のマウスでのみ産生が認められた。安定した抗MDA5抗体の産生を誘導するためヒトMDA5蛋白による免疫を併用し研究を進めている。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

今年度予定されていた研究は、抗MDA5抗体陽性皮膚筋炎モデルマウスのプルトコール樹立である。概ね、①Ⅰ型インターフェロン(IFN)の亢進、②間質性肺炎③抗MDA5抗体産生の3条件を満たすためのプトロコール開発は終えており、病態の解析へと進んでいる。

今後の研究の推進方策

抗MDA5抗体陽性DM-ILDモデルマウスから皮膚および肺を採取し、フローサイトメトリーによる細胞学的検討を行う。また病理組織学的にもマルチスペクトルイメージング（Mantraシステム）を用いた解析を行う。

次年度使用額が生じた理由

コロナ禍において学会参加がWeb参加となったため、旅費が大幅に削減された。また、研究試薬物品の購入にあたり、入荷搬入遅れが多く、試薬購入が次年度に持ち越されたため、当初予定支出金額より低い支出となった。
翌年度（2023年度）は学会現地参加が多く見込まれ、2022年度に購入を希望していた試薬の購入が可能となるため、残額は2023年度に使用予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Other iatrogenic immunodeficiency- associated lymphoproliferative disorders in a patient with anti-melanoma differentiation-associated gene 5-positive dermatomyositis: A case report and systematic literature review. (2023)
  • 著者名/発表者名: Nishimura N, Niwamoto T, Arai Y, Nakashima R, Terada K, Yoshizawa A, Sakamoto R, Tanizawa K, Handa T, Morinobu A, Hirai T.
  • 雑誌名: International Journal of Rheumatic Diseases 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1111/1756-185X.14608.
  • 査読あり
• [雑誌論文] A new autoantibody to valyl transfer RNA synthetase associated with anti-synthetase syndrome. (2022)
  • 著者名/発表者名: Sasai T, Nakashima R, Shirakashi M, Hiwa R, Tsuji H, Kitagori K, Akizuki S, Yoshifuji H, Mimori T, Morinobu A.
  • 雑誌名: Rheumatology (Oxford) 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1093/rheumatology/keac569.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cell surface-expressed Ro52/IgG/HLA-DR complex is targeted by autoantibodies in patients with inflammatory myopathies. (2022)
  • 著者名/発表者名: Arase N, Tsuji H, Takamatsu H, Jin H, Konaka H, Hamaguchi Y, Tonomura K, Kotobuki Y, Ueda-Hayakawa I, Matsuoka S, Hirano T, Yorifuji H, Murota H, Ohmura K, Nakashima R, Sato T, Kumanogoh A, Katayama I, Arase H, Fujimoto M.
  • 雑誌名: Journal of Autoimmunity 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1016/j.jaut.2021.102774.
  • 査読あり
• [雑誌論文] ECG Changes Through Immunosuppressive Therapy Indicate Cardiac Abnormality in Anti-MDA5 Antibody-Positive Clinically Amyopathic Dermatomyositis. (2022)
  • 著者名/発表者名: Matsuo T, Sasai T, Nakashima R, Kuwabara Y, Kato ET, Murakami I, Onizawa H, Akizuki S, Murakami K, Hashimoto M, Yoshifuji H, Tanaka M, Morinobu A, Mimori T.
  • 雑誌名: Frontiers Immunology 巻: Jan 7 ページ: 765140.
  • DOI: 10.3389/fimmu.2021.765140.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 皮膚筋炎のマネジメントUp to Date (2022)
  • 著者名/発表者名: 中嶋 蘭
  • 学会等名: 第121回日本皮膚科学会
  • 招待講演
• [学会発表] 小児期・成人発症の特発性炎症性筋疾患における自己抗体と臨床症状の関連性 (2022)
  • 著者名/発表者名: 辻 英輝, 中嶋 蘭, 白柏 魅怜, 鬼澤 秀夫, 日和 良介, 北郡 宏次, 秋月 修治, 大西 輝, 吉藤 元, 田中 真生, 八角 高裕, 市村 裕輝, 沖山 奈緒子, 森信 暁雄
  • 学会等名: 第31回日本小児リウマチ学会総会・学術集会
• [学会発表] 炎症性ミオパチーの病態と治療 筋炎の自己抗体 (2022)
  • 著者名/発表者名: 中嶋 蘭
  • 学会等名: 第40回日本神経治療学会
  • 招待講演