| 研究課題/領域番号 |
22K08584
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| 研究機関 | 京都府立医科大学 |
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研究代表者 |
村越 ふみ 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (20759906)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| キーワード | リーシュマニア / 共生ウイルス |
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| 研究実績の概要 |
リーシュマニア症は、リーシュマニア原虫によって引き起こされる人獣共通感染症である。サシチョウバエによって媒介され、原虫がヒトを含む哺乳動物のマクロファージに感染することで粘膜破壊や肝脾腫、皮膚の潰瘍を呈し時に致死的となる。近年、リーシュマニアを含む寄生性原生生物(原虫)の多くに、2本鎖RNA (dsRNA) ウイルスが存在していることが明らかとなった。原虫から検出されたウイルスは、外部から感染可能な構造を持たず、原虫の分裂に伴って受け継がれていくと考えられている。また、dsRNAウイルスの存在は原虫の宿主に対する病原性を高めることが、南米大陸で問題となる粘膜皮膚リーシュマニア原虫(Leishmania guyanensis)において報告された。その機構の一端として、原虫内のdsRNAウイルスが宿主のToll-like receptor (TLR)に認識され、炎症応答が活性化することが示唆されているが、詳細は明らかになっていない。
申請者は、RNA依存性RNAポリメラーゼ阻害剤を用いることによって、共生ウイルス(LRV2)を持つL. majorから、LRV2を持たないリーシュマニアを作出・クローン株を得ることに成功した。これにより、共生ウイルスの存在によるL. major側の遺伝子発現の変化とL. majorが感染した宿主側の遺伝子発現変化の詳細な比較解析が可能となった。今年度は、共生ウイルスの有無のみが異なるL. majorを用いて、マウスに感染実験をおこなった。その結果、共生ウイルスを持つL. majorを接種したマウスは病変の大きさが早期に悪化した。さらに、共生ウイルスの有無のみが異なるL. majorを接種したマウスの遺伝子発現変化の網羅的解析をおこなった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
今年度は共生ウイルスの有無のみが異なるL. majorを接種したマウスのトランスクリプトーム解析をおこなうことを目的としていたため、研究はおおむね順調に進展している。
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| 今後の研究の推進方策 |
共生ウイルスを除去したリーシュマニアに共生ウイルスを戻す実験が可能かを検討する。
トランスクリプトーム解析の結果をもとに、マクロファージへの感染実験やノックアウトマウスを用いた解析をおこない、変動のあった遺伝子がどのようにマウスの病態を悪化させたのかを詳細に解析する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
今年度はマクロファージを用いたin vitroの実験をおこなえなかったため、次年度使用額が生じた。
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