| 研究課題/領域番号 |
22K08749
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
中村 公治郎 京都大学, 医学研究科, 客員研究員 (10848203)
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| 研究分担者 |
影山 詔一 京都大学, 医学研究科, 特定病院助教 (60707545)
内田 洋一朗 京都大学, 医学研究科, 講師 (30597745)
瀬尾 智 京都大学, 医学研究科, 客員研究員 (70646546)
波多野 悦朗 京都大学, 医学研究科, 教授 (80359801)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| キーワード | 肝臓 / 虚血再灌流障害 / 自然免役細胞 |
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| 研究実績の概要 |
虚血再灌流障害 (IRI)は移植に伴うグラフト保存とその後の血流再開によってもたらされるグラフト障害であり，early allograft dysfunctionや拒絶にも影響するため，IRIの予防は移植医療における重要な課題である。肝IRIの発症において，虚血時に障害を受けたグラフト組織から染み出して再灌流と共に血中に放出されるDAPMS（damage associated molecular patterns）は自然免疫細胞を活性化し，それによりもたらされる炎症性細胞障害が肝障害を助長させる。その結果，より一層のDAMPSが放出され，自然免役細胞が更に活性化される。したがって肝IRIの予防戦略においてグラフト細胞の保護だけでなく，自然免疫細胞の制御を行うことは非常に重要である。肝移植においてグラフト（ドナー由来）のCEACAM1（CM1）がグラフト細胞死を軽減することがこれまでに報告されているが、レシピエントの自然免疫細胞の制御におけるCM1の役割に関しては、まだ十分に解明がなされていない。CM1ノックアウト（CM1-KO）マウスを同所性肝移植（orthotopic liver transplantation, OLT）モデルに用いることで、レシピエントの自然免疫細胞のCM1発現が移植肝に与える影響を検討した。
WTマウスから採取した肝臓を冷保存（18h）後にWTマウスまたはCM1-KOマウスに移植した。WT>WTに比べてWT>CM1-KOのOLTでは、再灌流6時間後の血清AST/ALTが有意に高く、組織学的IRIスコア（Suzuki's score）が有意に高く、TUNEL陽性の死細胞数が有意に多く、肝組織中のLy6G陽性細胞（好中球）数が有意に多いことが分かった。また移植肝にinfiltrateする免役細胞のうち、好中球がとりわけCM1を強発現していることも分かった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
マウスOLTモデルを用いた研究結果から、移植後の肝グラフトにinfiltrateするレシピエントの自然免役細胞のうち、好中球がとりわけCM1を強発現していることが分かった。好中球の制御におけるCM1の役割に着目して今後の研究を進める手掛かりが得られた。
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| 今後の研究の推進方策 |
令和4年度の成果をもとに、CM1が好中球を制御する機序について更なる解析を行う。骨髄由来の好中球をLPSまたは、冷保存ストレス後に肝から放出されるDAMPS（liver flush）にて刺激する実験を行い、Western blots、RT-PCRにて評価を行う。また、ヒトの肝移植症例から得られたサンプルの解析も行う。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
当初予定していた動物飼育管理費用が想定していたよりも少なかったので余剰が生じた。
今年度はCM1による好中球制御の機序を追究するため、マウス移植実験およびマウスからの好中球採取を行う。また、マウス・ヒトのサンプルに対する解析も行っていく予定である。
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