| 研究課題/領域番号 |
22K08782
|
|---|
| 研究機関 | 和歌山県立医科大学 |
|---|
研究代表者 |
川井 学 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (40398459)
|
|---|
| 研究分担者 |
北畑 裕司 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (00535338)
宮本 篤 和歌山県立医科大学, 医学部, 助教 (00756570)
山上 裕機 和歌山県立医科大学, 医学部, 学長特命教員(特別顧問) (20191190)
岡田 健一 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (50407988) [辞退]
宮澤 基樹 和歌山県立医科大学, 医学部, 博士研究員 (90549734) [辞退]
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
|
| キーワード | 膵癌 / 腸内細菌 / 16SrRNAメタ解析 / 化学療法 |
|---|
| 研究実績の概要 |
免疫抑制状態となっている腫瘍微小環境(Cold tumor)を、免疫原性のHot tumorに改変するため、腸内細菌叢に起因する免疫系の変化を活用する。本研究の目標は、①シンバイオテックス投与による腸内細菌叢調節が腫瘍免疫調節機構にどのように影響を与えるか探索的研究を行い、②シンバイオテックス介入による抗癌剤＋XCL1産生whole-cell-vaccine併用療法の抗腫瘍効果増強を証明することにより、臨床応用可能なシンバイオテックス介入によるXCL1産生Whole-cell-vaccineの開発を核とした抗癌剤を併用した新規複合癌免疫療法のコンセプトの確立することである。今年度は、コントロール群としてシンバイオテックスを投与していない膵癌患者10名登録して、化学療法前後における腸内細菌叢の変化、末梢血中単核球におけるCD8+Tcell、Treg、NK活性の変化を検討した。そのために、①化学療法投与前後の糞便200mgからPower Fecal DNA Isolation Kitを用いて、細菌のゲノムDNA抽出し、16S rRNAの可変領域であるV3、V4領域をターゲットとした特異的プライマーを設計し、次世代シークエンサーを用いて、すべての細菌に固有に存在する16SrRNA領域を対象とする16SrRNAメタ解析（細菌叢解析）によって、腸内細菌叢の系統解析を実施した。さらに②末梢血中単核球において比重遠心法を用い単核球分画を分離し、蛍光標識特異抗体による染色を行い、CD8+Tcell、Treg、NK活性myeloid derived suppressor cell (MDSC)の解析を行った。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
本研究は、シンバイオテックス投与による腸内細菌の変化が腫瘍免疫調節機構にどのように影響を与えるかの探索的研究を行うために、膵癌手術患者にシンバイオテックス投与による腸内細菌叢の変化がどのように膵微小環境に変化をもたらすかを検討することとしている。本研究では、まず、コントロールとして、シンバイオテックスを投与していない膵癌患者に対して化学療法が腸内細菌叢に与える影響を16SrRNAメタ解析（細菌叢解析）および末梢血中単核球におけるCD8+Tcell、Treg、NK活性の変化によって検討した。そして、その結果から、シンバイオテックス投与のない、通常の化学療法前後で腸内細菌がどのように変化するかを検討している。しかし、シンバイオテックス投与による腸内細菌叢検討の前実験の解析結果が遅れており、シンバイオテックス投与群における化学療法前後における腸内細菌叢の変化、末梢血中単核球におけるCD8+Tcell、Treg、NK活性の変化に関する研究の開始がやや遅れている。
|
| 今後の研究の推進方策 |
今後は、膵癌患者の登録を促進し、前向き研究としてシンバイオテックス投与群における化学療法前後における腸内細菌叢の変化、末梢血中単核球におけるCD8+Tcell、Treg、NK活性の変化を検討する研究を推進する。同時進行として、現在までの抗癌剤未治療および抗癌剤治療後の膵癌組織における腫瘍内細菌の16SrRNAメタ解析に関する実験計画書を倫理委員会に提出し、承認後、速やかに腫瘍内細菌の16SrRNAメタ解析を進めて、研究全体の進行を推進する。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
当初の予定では、シンバイオテックスを投与していない、従来の膵癌患者に対して、化学療法前後における腸内細菌の系統解析を10例になるまで行い、化学療法が腸内細菌叢に及ぼす影響を詳細に解明する予定であった。10例の16SrRNAメタ解析（細菌叢解析）および末梢血中単核球におけるCD8+Tcell、Tregの解析は終了したが、次の予定であった、シンバイオテックス投与による抗癌剤投与前後の腸内細菌叢の変化を検討する研究が遅れたため、これらの物品費用などは次年度に持ち越すこととなった。
|
