| 研究課題/領域番号 |
22K08937
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| 研究機関 | 山口大学 |
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研究代表者 |
白澤 文吾 山口大学, 大学院医学系研究科, 教授 (80444719)
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| 研究分担者 |
鈴木 亮 山口大学, 大学院医学系研究科, 助教 (10570319)
上野 耕司 山口大学, 医学部附属病院, 助教 (30736070)
濱野 公一 山口大学, 大学院医学系研究科, 教授 (60263787)
溝口 高弘 山口大学, 医学部附属病院, 助教 (90844796)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| キーワード | 細胞シート / 再生医療 |
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| 研究実績の概要 |
本年度は、糖尿病C57BL/6マウスの背部に6mmの生検パンチで作製した全層欠損部位に、凍結保存後に解凍して、移植した自家線維芽細胞シートおよび他家線維芽細胞シートの治療効果を検討した。
他家線維芽細胞シートは、C3Hの尾から単離した線維芽細胞から作製した。自家線維芽細胞も同様の方法で、C57BL/6マウスの尾から単離した線維芽細胞から作製した。細胞シートの作製および凍結方法として、24-well plateの1ウェルに4.2x105個の細胞を播種して一晩培養後、ウェルの培養液を細胞保存液に置換した。24-well plateを3Dフリーザーの庫内にセットし、-35℃、20分間で細胞を凍結後、24-well plateを-80℃フリーザーで冷凍保管した。細胞シート移植2日前に、24-well plateを37℃プレート上にセットし、細胞を解凍後にウェルの溶液を培地に置換して2日間培養した。そして、上記に記載した糖尿病C57BL/6マウスの背部に線維芽細胞シートを移植した。治療実験において、凍結していない非凍結自家線維芽細胞シートおよび非凍結他家線維芽細胞シートに対して、凍結解凍後に培養した自家線維芽細胞シートおよび凍結解凍後に培養した他家線維芽細胞シートの治療効果を比較検討した。自家および他家の両方において、凍結解凍後に培養した線維芽細胞シートは、非凍結線維芽細胞シートと同等の治療効果を示す結果を得た。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
凍結解凍後に培養した線維芽細胞シートの治療効果を検証することが出来たため。
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| 今後の研究の推進方策 |
治療実験時の組織を使用して、線維芽細胞シートの凍結の有無、および、他家線維芽細胞の免疫拒絶についての病理学的解析を行う。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
次年度使用額が生じた理由として、培地等の使用を予定よりも抑えることが出来た為である。使用計画としては、英文校正費等で使用する。
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