| 研究課題/領域番号 |
22K09062
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
長谷 由理 北海道大学, 大学病院, 助教 (20626121)
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| 研究分担者 |
舩橋 誠 北海道大学, 歯学研究院, 教授 (80221555)
長谷部 晃 北海道大学, 歯学研究院, 教授 (90281815)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| キーワード | 全身麻酔薬 / 作用機序 / 脂質ラフト / バイオイメージング / パッチクランプ法 / ATPase |
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| 研究実績の概要 |
全身麻酔薬の作用の場が脂質ラフトであると仮定し、全身麻酔薬による脂質ラフトの流動性や構造の変化があることを生細胞で可視化することを目標に、研究を進めた。
バイオイメージングの専門家の指導・協力を得て、CHO-K1のGPI-HT安定発現株の培養を開始した。2023年7月に大阪大学で開催された第34回細胞生物学ワークショップに参加し、顕微鏡の基礎からイメージングまでの研修を受けた。
8月から北海道大学ニコンイメージングセンターにて、共焦点レーザー顕微鏡の観察技術を学び、光褪色後蛍光回復法（FRAP）法の基礎的な観察訓練を行った。また、文部科学省・科学研究費助成事業の先端バイオイメージング支援プラットフォーム（ABiS）への申請が採択され、研究支援を受けることができた。
2024年1月から、実際に生細胞に麻酔薬を作用させて、FRAP法にて観察をおこなったところ、プロポフォールにより脂質の流動性が上昇することが示唆される結果が得られた。現在、共同研究者・研究協力者と結果の詳細な解析を進めているところである。
脂質ラフトに存在する酵素であるNa,K-ATPase及びCa,Mg-ATPase活性に対するプロポフォールの作用に関する研究を行い、「Neuro-2a細胞のATPase活性に対するpropofolの作用」として、第51回日本歯科麻酔学会学術集会（長崎）においてポスター発表を行った。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
医局の新体制のもと臨床業務に従事する時間が長く、研究時間の確保が困難であった。年度の後半には、ニコンイメージングセンターにおける研究を進展させることができたが、予定より進行は遅れている。
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| 今後の研究の推進方策 |
イメージングを行うための準備と実際の観察までを行ったため、データの解析処理を進める。これを第一歩として、異なる条件の下での観察や、各種麻酔薬による生細胞への影響を検討すること、またFRAP法を今後の研究の一つの手法として応用していきたい。
イメージングの研究を進めながら、共同研究者との電気生理学的手法による全身麻酔薬の作用機序研究を開始する。
また、これまで継続して行ってきた脂質ラフトに存在するATPase、特にNa,K-ATPaseとCa,Mg-ATPase活性に対する麻酔薬の作用について検討を進める。さらに、培養細胞の増殖・生存に対する麻酔薬の作用も定量的に解析する予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
細胞培養に必要な物品は、すでに歯科麻酔学教室実験室に備わっているものを主に使用し、顕微鏡観察に必要な物品を主に購入した。ABiS支援のお陰で施設使用料も少なく抑えられているが、今後も施設利用や消耗品の購入が必要であり、可能な限り研究成果の発表を行う。計画的な執行を予定している。
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