| 研究課題/領域番号 |
22K09239
|
|---|
| 研究機関 | 札幌医科大学 |
|---|
研究代表者 |
鵜飼 亮 札幌医科大学, 医学部, 助教 (30896113)
|
|---|
| 研究分担者 |
佐々木 祐典 札幌医科大学, 医学部, 准教授 (20538136)
本望 修 札幌医科大学, 医学部, 教授 (90285007)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
|
| キーワード | 骨髄間葉系幹細胞 / エクソソーム / 脳梗塞 / 神経栄養因子 |
|---|
| 研究実績の概要 |
①実験的脳梗塞モデルに対する骨髄間葉系幹細胞（Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ：ＭＳＣ）の経静脈的投与による治療効果②神経栄養因子を含む種々のタンパク質が内包されているＭＳＣ由来エクソソーム（ＭＳＣｅｘｏ）の経静脈投与による神経損傷に対する治療効果が報告されている。本研究では、神経損傷に対するさらなる治療効果を得るために，神経栄養因子高発現を起こす遺伝子改変ＭＳＣ由来エクソソーム（遺伝子改変ＭＳＣｅｘｏ）などを用いて、実験的脳梗塞モデルに対する治療効果を検証する。さらには、ＭＳＣ併用下でのＭＳＣｅｘｏ、遺伝子改変ＭＳＣｅｘｏ療法の治療効果を検証する。解析方法は生化学的解析（ＥＬＩＳＡなど）、行動学的解析（トレッドミルなど）、ＭＲＩ解析（DTIによる神経線維数の変化など）を用いて、以下の方法を予定している。
方法１：種々のＭＳＣｅｘｏによる治療効果の比較解析、方法２：ＭＳＣ治療との併用下におけるＭＳＣｅｘｏの効果の比較解析、方法３：種々のＭＳＣｅｘｏの網羅的ｍｉＲＮＡ解析、プロテオーム解析
本年の研究成果に関して、①実験的動物モデルの作成、②治療に十分な量のエクソソームを確実に回収するためのプロトコールの確立（十分量を確保するための細胞数の検証、超遠心時間の再調整）、③回収したエクソソームの確認（エクソソーム溶液内に含有されるタンパク質量の測定、MSC由来エクソソームのマーカーの確認、電子顕微鏡での肉眼的確認）を実施した。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
機材の予期せぬ故障があったが、おおむね予定通り進展している
|
| 今後の研究の推進方策 |
今後の計画としては、実験的脳梗塞モデルへのＭＳＣｅｘｏならびにＭＳＣ投与を行い、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｉｎ ｖｉｖｏでの検討をすすめていく予定である。また、同時にＭＳＣｅｘｏの網羅的プロテオーム解析ならびにmiRNA解析を実施する予定である。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
当該年度では、海外で行われる学会への費用を計上していたが、渡航制限により出席が出来なかったことが挙げられる。次年度は海外学会への出席ならびにさらなるデータの蓄積を計画している。
|
