| 研究課題/領域番号 |
22K09721
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| 研究機関 | 千葉県がんセンター(研究所) |
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研究代表者 |
木下 崇 千葉県がんセンター(研究所), 頭頸科, 部長 (00648462)
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| 研究分担者 |
関 直彦 千葉大学, 大学院医学研究院, 准教授 (50345013)
花澤 豊行 千葉大学, 大学院医学研究院, 教授 (90272327)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| キーワード | 口腔癌 / エクソソーム / 血清 / シークセンス / microRNA |
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| 研究実績の概要 |
昨年度の口腔癌患者血清検体の解析において、手術後1年以上経過した症例の中で再発例5例と非再発例4例の血清からMagCapture Exosome Isolation Kit PSを用いてエクソソームの抽出を行った後にRNAを抽出しsmall RNAシークエンスを行った。シークエンスの結果、平均で14.9百万リードが得られ、そのうちmcroiRNA及びpiRNAにマップされた割合は平均 58%であった。得られたシークエンス結果をTMM法にて正規化し、再発群と非再発群の比較を行い、再発群で有意に発現上昇を認めたmiRNAを同定した。これら microRNAについてTCGAのデータを用いて、頭頸部癌における予後の相関を検討した。その結果、miR-154、miR-382およびmiR-763においては発現が高い群が有意に全生存率が低いことが明らかとなった。今年度はこれらmicorRNAの中でmiR-382についてin vitroの解析を行った。まずmiR-382がオートクラインで癌細胞自身に影響を与えるかを検討したが、癌細胞自身の増殖能には有意な変化は認められなかった。そこで、癌細胞から生成されるmiR-382が周囲の免疫細胞に影響を与えるかどうかを検証することとした。現在、Jurkat細胞にmiR-382をウイルスを用いて導入し、細胞に刺激を与えた時の活性化に影響を与えるかを検証中である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
microRNAが癌細胞にオートクライン的に悪性化をもたらすことを仮説として実験を進めていたが、癌細胞自身にはフェノタイプを示さないことが明らかとなった。
現在は方針を転換し、周囲の細胞、特に免疫細胞に影響があるかを検証している。
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| 今後の研究の推進方策 |
T細胞の挙動を模倣するJurkat細胞にmiR-382を導入し、細胞の増殖能や活性化能に影響を与えるかを検証する。また、健康成人の末梢血から免疫細胞を抽出し、miR-382が影響を与えるかを検証していく。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
予定よりも学会参加が少なかったため
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