研究課題
ヘミデスモソーム(細胞－基質間接着装置)構成蛋白であるBP180は、水疱性類天疱瘡の主 要な抗原として知られている。これまでに、各種ヘミデスモソーム構成因子が皮膚の創傷治癒や癌進展に関わっていることが証明されているものの、BP180については、その発現制御機構のみならず、癌の病態における役割も未解明のままである。そこで、本研究課題は、口腔扁平上皮癌におけるヘミデスモソーム構成蛋白 BP180の発現制御機構（正常組織とのメカニズム異同）解析、さらにそのリガンドの同定を行い、口腔癌の浸潤過程におけるBP180の役割を追究し、癌進展におけるBP180の分子基盤を明らかにすることを目的としている。これまでに、培養細胞を用いた実験により、BP180発現制御が野生型p53のみならずmiR-203a-3pによっても行われていることを証明した。なお、その際、miR-203a-3pはp53非依存的にBP180の発現を制御するが、同時にp53が当該 miRNAの発現制御を行うことを示唆するデータを得た。そこで、本研究では、これらの実験結果をふまえ、口腔癌におけるBP180、野生型p53、変異型p53、miR-203a-3pの連関と発現制御の相互性について、ヒト正常歯肉細胞株、口腔癌細胞株を用いた強制発現系・ノック ダウン実験、転写解析（プロモーター解析実験）を行なった。また、実際のヒト口腔癌組織においてもin vitroで証明された関係が成立しているか検証を行い、BP180 の発現制御機構を解析した。これまでの解析結果から、BP180の転写誘導には、野生型p53 、変異型p53、miR203a-3p の両者が相互に関与していることを証明している。また、癌組織におけるBP180が、接着装置因子としてだけでなく、基底膜の形成や維持にも寄与していること、また、癌の浸潤機構には、そのシステム崩壊が深く関わっていることを示唆するデータを得た。
2: おおむね順調に進展している
当初の計画通りに進捗している。
BP180の様々な欠失変異体を作成し、培養細胞に導入することで、ヘミデスモソームへの組み込みに対する影響を解析し、基底膜成分の存在あるいは非存在下で、 ヘミデスモソーム構成因子の局在を解析する。さらに、それぞれの変異体導入時におけるヘミデスモソーム構成効率、細胞接着能力、細胞運動能、浸潤能の評価を2Dおよび3Dの細胞培養系で行う。
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Biochim Biophys Acta Mol Cell Res
巻: 1870(2) ページ: 119404
10.1016/j.bbamcr.2022.119404
