| 研究実績の概要 |
不死化前駆褐色脂肪細胞に対する分化誘導開始日をday0とし、day0からエリスロポエチン（以下EPO）および比較対象としてCL316,243（選択的β3アドレナリン受容体アゴニスト、以下CL）を継続投与した。day4,6,8の各段階におけるOil Red O染色で、Control群に比してCL群では脂肪滴が増加（褐色脂肪細胞への分化促進）していたのに対し、EPO群では濃度依存性に脂肪滴形成が減弱していた。day8蛋白サンプルを用いたWestern blottingでは、褐色脂肪マーカーのPRDM16やPGC1-α、脂肪滴形成マーカーのperilipin発現量がEPO濃度依存性に低下していた。さらに、day2のmRNAサンプルでは、褐色脂肪マーカーのPPARγ,Cidea,Elovl3,CEBPα発現量がEPO濃度依存性に低下していた。このことから、前駆細胞の分化過程においてEPOは褐色脂肪細胞の成熟を抑制する作用を持つことが示唆された。
次に、分化誘導のみ施した細胞にday6からEPOやCLを投与して検討した。day8のOil Red O染色では、Control群に比してCL群では脂肪滴がさらに増加したのに対して、EPO群では濃度依存性に脂肪滴の増加が抑制された。day8のmRNA発現量の比較では、UCP1,PRDM16,PGC1-α,Cidea,Elovl3,FGF21がEPO濃度依存性に増加していた。このことから、成熟が進んだ段階ではEPOは褐色脂肪細胞を活性化し、脂肪滴をエネルギーとして消費する可能性が示唆された。
EPO投与による下流の蛋白リン酸化の時間的変化を評価した。分化誘導day2の細胞にEPOを投与すると、投与後15-30分にEPO受容体のリン酸化がピークを迎え、並行してSTAT3のリン酸化が確認された。加えて、同時期からErk1/2のリン酸化が増加した。
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