| 研究課題/領域番号 |
22K16586
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| 研究機関 | 東北大学 |
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研究代表者 |
齋藤 秀悠 東北大学, 大学病院, 助教 (90908641)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| キーワード | オキシトシン / 脳卒中後慢性疼痛 |
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| 研究実績の概要 |
4～6週齢の野生型およびオキシトシンリガンドノックアウトマウスに対してⅣ型コラゲナーゼを脳定位固定装置を用いて視床内に注入し、脳卒中後慢性疼痛（CPSP）モデルマウスを作成した。その2週後にvon-Frey試験を施行した。その後で潅流固定を行って脳組織を取り出し、切片標本を作成して目的とする部位にⅣ型コラゲナーゼが注入されているのか、また一部は脳内での炎症反応やオキシトシンの発現がどのようになっているのかを観察した。CPSPモデルマウスの作成成功率は結果的に5割前後となった。
昨年度まで2年弱かけて動物実験施設の改修工事に伴うマウスを含めた実験施設の移動と重なったことから、思うような個体数での実験が進まず、上記実験自体も最小限の個体数で行うにとどまり、CPSP群と比較して対照群での実験もほぼ行うことができず、またウエスタンブロッティングを用いた定量的評価までは行えなかった。
行なうことができた実験内容とも併せても、目的としていたCPSPに対するオキシトシンの関与を結論付けるまでの結果を得るにはもう少し時間がかかると考えられる。現在少しずつ新動物棟で繁殖させたノックアウトマウスを用いて実験を進めようとしているところである。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
昨年度まで2年弱かけて動物実験施設の改修工事に伴うマウスを含めた実験施設の移動を行っており、移動の度にマウスのクリーニングおよび繁殖し直しを余儀なくされていたことから、思うような個体数での実験が進まず、実験自体も最小限の個体数で行うにとどまったため。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後は4～6週齢の各種マウスを用いた同実験を更に個体を増やして行う。その際に野生型とオキシトシンリガンドノックアウトマウスだけでなく、オキシトシン受容体ノックアウトマウスに対しても行っていく予定である。その際には切片標本を直接観察するだけではなく、免疫染色やウエスタンブロッティングを用いてⅣ型コラゲナーゼが注入された周囲や本来オキシトシンや炎症反応を観察するc-fosがどの程度発現しているのかを観察していく予定である。そして何よりCPSPモデルマウスの作成成功率を上昇させ、マウスの無駄な使用を極力少なくしていくことが目標である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
これまで実験をなかなか行うことができず、使用できていなかったが、実験をこれから本格的に進めていくに当たって、抗体や実験器具などを含めた購入費用、また免疫染色を行った後で観察していくための顕微鏡使用費用、画像処理をするためのパソコン購入費用など、各種経費がかかるため。
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