| 研究課題/領域番号 |
22K18402
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| 研究機関 | 松本歯科大学 |
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研究代表者 |
小林 泰浩 松本歯科大学, 総合歯科医学研究所, 教授 (20264252)
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| 研究分担者 |
石田 昌義 松本歯科大学, 総合歯科医学研究所, 講師 (50643251)
溝口 利英 東京歯科大学, 歯学部, 教授 (90329475)
中道 裕子 松本歯科大学, 総合歯科医学研究所, 准教授 (20350829)
岩本 莉奈 松本歯科大学, 総合歯科医学研究所, 助教 (20907216)
上原 俊介 松本歯科大学, 歯学部, 講師 (90434480)
村上 康平 岡山理科大学, 獣医学部, 講師 (60791837)
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| 研究期間 (年度) |
2022-06-30 – 2026-03-31
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| キーワード | 細胞老化 / Wnt / p16 |
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| 研究実績の概要 |
1．細胞種特異的老化マウスの確立: CMVプロモータ下でp16を発現するトランスジェニックマウス（flox-STOP-flox p16）を作製し、トランスジーンを持つマウスのラインを得た。このマウスを全身でCreを発現するCMV-Creマウスと交配し、そのF1を解析した。p16を強く発現するF1マウスの遺伝子発現を解析した結果、炎症老化マーカーであるINF-bおよびDkk1の発現が顕著に増加した。flox-STOP-flox p16マウスとCreマウスを交配することで、細胞種特異的に細胞老化を誘導させるモデルが作出できた。2．老化細胞によるWntシグナル抑制機構の解明：細胞老化を誘導した間葉細胞はDkk1とINF-bを発現することを明らかにしてるいる。遺伝子ノックダウン実験を行い、これらの遺伝子の発現にcGAS-STINGシグナル系が関与することを明らかにした。老化した細胞上清や老化マウスの血清ではcGASのリガンドであるcGAMP濃度が上昇することが明らかになった。3．血管内皮特異的RANK cKOマウスの解析： 32週齢の骨組織の血管にはRANKが発現することを明らかにしている。蛍光ラベルしたRANKLを静脈投与した結果、血管内皮細胞に蛍光ラベルされたRANKLが検出された。これは血管内皮細胞にRANKが発現することを意味する。さらに、32週齢のRANKcKOマウスでは、骨髄球増加など老化に伴い認められる表現形が抑制された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
p16を発現するトランスジェニックマウス（flox-STOP-flox p16）を作製し、CMVCreマウスと交配することで、細胞老化を誘導することに成功した。32週齢のRANKcKOマウスで老化骨髄の表現形が抑制されることを明らかにした。
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| 今後の研究の推進方策 |
p16を発現するトランスジェニックマウス（flox-STOP-flox p16）とLepRCreを交配し、骨髄間葉細胞に細胞老化を誘導したマウスを解析する。さらに、血管内皮細胞特異的Creマウスおよびマクロファージ特異的Creマウスを用いることで、これらの細胞特異的に細胞老化を誘導し、老化細胞除去機構を解析する。
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