迅速な高性能蛍光免疫センサー構築を指向した直交ペプチドペアの高効率スクリーニング

2023 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 22K20477
• 研究機関: 東京工業大学
• 研究代表者: 安田 貴信 東京工業大学, 科学技術創成研究院, 助教 (90963249)
• 研究期間 (年度): 2022-08-31 – 2024-03-31
• キーワード: コイルドコイル / ペプチド / 酵母 / ファージ

研究実績の概要

本年度は、直交ペプチドペアスクリーニングのモデル実験として、E4を提示する酵母とK4を提示するファージを調製して両者を混合し、フローサイトメーターを使って酵母/ファージ複合体の選択を試みた。この時、K4提示ファージを抗M13抗体-PEで標識する場合と、抗M13抗体-HRPとビオチニルチラミドの反応により酵母表面をビオチン化しストレプトアビジン-PEで標識する場合について検討した。いずれの場合でもK4提示ファージ非存在下に比べて存在下でPE由来と思われるシグナルを示す集団が見られた。この集団についてソーティングと培養を行ったのちフローサイトメーターを使った解析を行ったところ、抗M13抗体-PEを用いて標識した場合でE4提示酵母がより高い割合で濃縮されていることを確認できた。

研究成果

• [雑誌論文] 互いに引き合う螺旋状ペプチド～二量体形成から細胞療法まで～ (2024)
  • 著者名/発表者名: 安田貴信、北口哲也
  • 雑誌名: アグリバイオ 巻: 8 ページ: 85～91
• [雑誌論文] Efficient and rapid linker optimization with heterodimeric coiled coils improves the response of fluorescent biosensors comprising antibodies and protein M (2023)
  • 著者名/発表者名: Sasamoto Kana、Yasuda Takanobu、Zhu Bo、Ueda Hiroshi、Kitaguchi Tetsuya
  • 雑誌名: The Analyst 巻: 148 ページ: 5843～5850
  • DOI: 10.1039/d3an01499a
  • 査読あり
• [雑誌論文] 互いに引き合う螺旋状ペプチド～二量体形成から細胞療法まで～ (2023)
  • 著者名/発表者名: 安田貴信、北口哲也
  • 雑誌名: 細胞 巻: 55 ページ: 749～753
• [学会発表] 順平行コイルドコイルペプチド型蛍光プローブによる蛍光免疫センサの応答の向上 (2024)
  • 著者名/発表者名: 笹本佳那、安田貴信、朱博、上田宏、北口哲也
  • 学会等名: 第12回日本生物工学会東日本支部コロキウム
• [学会発表] ゲノム編集によるオープンサンドイッチ免疫測定用抗体の構築と均一測定系への展開 (2024)
  • 著者名/発表者名: 小野義光、有坂亮汰、二宮歩武、柴田貴広、内田浩二、安田貴信、朱博、董金華、上田宏、北口哲也
  • 学会等名: 化学工学会第89回年会
• [学会発表] Single fluorescent protein-based biosensor for monitoring Intracellular IP3 dynamics (2024)
  • 著者名/発表者名: Tian Li、山下慶介、安田貴信、坪井貴司、朱博、上田宏、北口哲也
  • 学会等名: 化学工学会第89回年会
• [学会発表] バイオセンサーに変換可能な抗体の取得に向けた蛍光プローブタンパク質の開発 (2024)
  • 著者名/発表者名: 渋川夏希、笹本佳那、瀬尾秀宗、安田貴信、朱博、太田邦史、上田宏、北口哲也
  • 学会等名: 化学工学会第89回年会
• [学会発表] 発光酵素断片のトラップ&リリースに基づく抗原検出法 (2024)
  • 著者名/発表者名: 安田貴信、朱博、上田宏、北口哲也
  • 学会等名: 化学工学会第89回年会
• [学会発表] タンパク質言語モデルを用いた一変異効果予測による蛍光免疫センサーの機能向上 (2024)
  • 著者名/発表者名: 井上暁人、朱博、安田貴信、水谷圭佑、小林健、北口哲也
  • 学会等名: 化学工学会第89回年会
• [学会発表] A customizable one-pot detection system using β-glucuronidase switch and label-free antibody (2024)
  • 著者名/発表者名: 朱博、山崎侑彦、安田貴信、銭成、丘しじゅう、上田宏、北口哲也
  • 学会等名: 化学工学会第89回年会
• [学会発表] 抗原抗体反応が抗体結合タンパク質によって阻害されることを利用した免疫センサーの開発 (2023)
  • 著者名/発表者名: 二宮歩武、銭成、安田貴信、朱博、上田宏、北口哲也
  • 学会等名: 第75回日本生物工学会大会
• [学会発表] Fabrication of nanobody-based ratiometric bioluminescent quenchbody for simple and rapid detection (2023)
  • 著者名/発表者名: Yinghui Yang, Akihito Inoue, Takanobu Yasuda, Bo Zhu, Hiroshi Ueda, Tetsuya Kitaguchi
  • 学会等名: 第75回日本生物工学会大会
• [学会発表] 抗体結合タンパク質を利用した全長抗体の生物発光センサー化 (2023)
  • 著者名/発表者名: 安田貴信、朱博、上田宏、北口哲也
  • 学会等名: 化学工学会第54回秋季大会
• [学会発表] 生物発光免疫センサーの発光活性増大機構の解明とその原理の全長抗体への展開 (2023)
  • 著者名/発表者名: 安田貴信、朱博、上田宏、北口哲也
  • 学会等名: 第2回日本抗体学会学術大会
• [学会発表] Improvement of gibberellin fluorescent immunosensor applicable to live-cell imaging (2023)
  • 著者名/発表者名: Zixu Feng, Hiroshi Aihara, Shun Sakuraba, Yanyan Hou, Keisuke Yoshida, Takanobu Yasuda, Bo Zhu, Hiroshi Ueda, Toshiro Ito, Tetsuya Kitaguchi
  • 学会等名: 第2回日本抗体学会学術大会
• [備考] researchmap
  • URL: https://researchmap.jp/tyasuda28