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2023 年度 研究成果報告書

CTニューロンの全シナプス入力可視化による皮質-視床ループ回路構造の解明

研究課題

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研究課題/領域番号 22K20694
研究種目

研究活動スタート支援

配分区分基金
審査区分 0704:神経科学、ブレインサイエンスおよびその関連分野
研究機関順天堂大学

研究代表者

岡本 慎一郎  順天堂大学, 健康総合科学先端研究機構, 特任助教 (70746940)

研究期間 (年度) 2022-08-31 – 2024-03-31
キーワード細胞標識法 / Glyoxal固定法 / 透明化法 / 神経回路解析
研究成果の概要

皮質6層の神経細胞を効率的に標識するため、AAVベクターのセロタイプによる感染特異性の違いについて調査した。その結果、どのセロタイプにおいても感染特異性の問題を排除することは困難であることが判明した。代替の標識法として、細胞に直接色素(Lucifer Yellow)を注入する手法を開発し、樹状突起の明瞭な可視化に成功した。
また、細胞膜に局在する蛋白の検出に優れたGlyoxal固定と透明化法を併用する手法の開発もおこなった。ScaleSF法を用いてGlyoxal固定サンプルを透明化することに成功した。
これらの手法を開発したことによって、効率的なシナプス入力解析が可能となった。

自由記述の分野

神経解剖学

研究成果の学術的意義や社会的意義

本研究では、任意の神経細胞の樹状突起を効率的に可視化するLucifer Yellow注入法、細胞膜に局在する蛋白の検出に優れたGlyoxal固定サンプルを透明化する方法の開発をおこなった。これらの手法を組み合わせることにより、標識する細胞数のコントロールが難しく多数のマウスが必要となるウイルスベクター注入法に比べて、より効率良く樹状突起のシナプス入力を解析することが可能となった。
本研究成果は、神経細胞が構築するネットワーク解析におけるコストの削減だけでなく、実験に必要となる動物数の減少といった動物倫理の面においても貢献すると期待される。

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公開日: 2025-01-30  

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