腎炎モデルマウスを用いたmRNAワクチンによる抗原特異的免疫寛容誘導治療法の開発

2022 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 22K20912
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 郡山 弘 大阪大学, 大学院医学系研究科, 助教 (60710093)
• 研究期間 (年度): 2022-08-31 – 2024-03-31
• キーワード: 免疫寛容

研究実績の概要

Sm抗原エピトープをコードするm1ΨmRNAワクチンの投与は、腎炎モデルマウスに、Sm抗原特異的な免疫寛容を誘導すること、それに伴い腎炎抑制効果が認められることについての詳細な検討を行っている。具体的には、mRNA Synthesis System(TAKARA)を用いて３種のSm抗原エピトープをそれぞれコードするm1ΨmRNAワクチンを作成し、先行研究（Krienke C, Science, 2021; Kranz LM, Nature, 2016）と同様に、LNP作製キット（Funakoshi）を用いてLNPを調整した。そして病態モデルマウスでの実験の前に、通常のマウスでの抗体価が上昇するか等の検討を行った。現在、各Sm抗原エピトープに対する抗体産生の有無、程度等の解析を行っている。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

mRNAの修飾についての報告等を踏まえて検討を行ったため、mRNAワクチンの設計に時間を要した。

今後の研究の推進方策

引き続き作成したmRNAワクチンの評価を進め、Pristane誘導腎炎マウスに投与し、蛋白尿の定量、腎臓の組織学的検討（HE染色およびIgG免疫複合体の傾向観察）により、腎炎の改善の程度を評価する。また脾細胞のFACSにより、Sm抗原エピトープ特異的な制御性Ｔ細胞を定量評価する。
またOVA257-264エピトープに対するm1ΨmRNAワクチンについても、Sm抗原エピトープのm1ΨmRNAワクチンと同様にマウスに投与し、腎炎部位でTFN-γ陽性あるいはIL-17A陽性のCD４陽性エフェクターT細胞、および制御性T細胞を定量し、このm1ΨmRNAワクチンが抗原分子の種類を超えて、炎症部位での免疫寛容を誘導するか否か、その程度等を評価する。