節外性リンパ腫における腫瘍細胞と微小環境の多様性の包括的探索

2022 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21J21338
• 配分区分: 補助金
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 湯淺 光博 東京大学, 大学院医学系研究科, 特別研究員(DC1)
• 研究期間 (年度): 2021-04-28 – 2024-03-31
• キーワード: 腫瘍微小環境

研究実績の概要

節外性リンパ腫はリンパ節外に発生するリンパ節の総称であり、対をなす節性リンパ腫と異なり、リンパ球が本来は集積していないリンパ節外の各臓器で異常増殖していることが病気の本態である。そのため、節外性リンパ腫はリンパ節外に出るための形質変化とリンパ節外で増殖する形質変化を共に獲得していると想定される。しかし、これらの特徴を明らかにするためには、腫瘍細胞自体の解析のみならず微小環境に存在する多様な細胞も解析する必要があるが、既存の研究は腫瘍細胞に周囲の細胞が混入した検体で解析しており、両者の区別ができず節外性リンパ腫の特徴を十分に検討できていなかった。本研究では、節外性リンパ腫における腫瘍細胞自体の不均一性と腫瘍微小環境の多様性を単一細胞レベルで解析し、節外性リンパ腫の特徴を明らかにする。また、臨床データや予後との関連について解析を行い、同定された特徴の臨床的意義を解明することを目的とする。
研究方法としては 、節外性リンパ腫の臨床検体を対象として、CITE-seq技術を用いて、多数の表面マーカー解析とトランスクリプトーム解析・TCR/BCRレパトア解析を行い、腫瘍細胞自体の多様性と腫瘍微小環境の網羅的探索を行った。
腫瘍細胞では、リンパ腫サブセット毎の特徴的発現プロファイルを明らかにすると共に、非腫瘍細胞分画では、疲弊したCD8T及び細胞周期が亢進したCD8Tが, クローン拡大を伴って増加していること、腫瘍微小環境に特徴的な制御性T細胞の増加していることを明らかにした。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

節外性DLBCL(中枢神経原発)に対して、CITE-seq解析を行なった。腫瘍細胞のCITE-seq解析にTCR/BCRレパトア解析を組み合わせることで、腫瘍細胞及び非腫瘍細胞の同定を行った。腫瘍細胞は, その細胞起源に依って特徴的な発現プロファイルを示していることを確認した。非腫瘍細胞分画においては, 多彩なT細胞分画が存在していることを確認した。DLBCLは, 反応性リンパ節とは異なるT細胞分画を有しており, 更にDLBCLのサブタイプに依って, 分画構成が異なることを明らかにした。特にABCサブタイプにおいて, 疲弊したCD8T及び細胞周期が亢進したCD8Tが, クローン拡大を伴って増加していることを明らかにした。また腫瘍微小環境に特徴的な制御性T細胞の増加も確認した。リガンド・レセプター関係にある遺伝子の発現から, 細胞間相互作用を推定し, それぞれのDLBCLサブタイプにおける腫瘍微小環境を構成する分画の関連性を検討した。
腫瘍細胞および非腫瘍細胞分画の双方で特徴的な性質を明らかにできており、おおむね順調に進展している。

今後の研究の推進方策

得られた免疫微小環境の意義を明らかにするため、マウスモデルを用いた機能解析や治療ターゲットの探索を行っていく予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Tumor-promoting function and regulatory landscape of PD-L2 in B-cell lymphoma (2022)
  • 著者名/発表者名: Shingaki Sumito、Koya Junji、Yuasa Mitsuhiro、Saito Yuki、Tabata Mariko、McClure Marni B.、Ogawa Seishi、Katayama Kotoe、Togashi Yosuke、Imoto Seiya、Kogure Yasunori、Kataoka Keisuke
  • 雑誌名: Leukemia 巻: 37 ページ: 492～496
  • DOI: 10.1038/s41375-022-01772-1
• [学会発表] A single-cell transcriptome and surface proteome analysis of the tumor and immune microenvironment in DLBCL (2022)
  • 著者名/発表者名: 湯淺 光博
  • 学会等名: 第84回日本血液学会学術集会
• [学会発表] A single-cell transcriptome and surface proteome analysis of the tumor and immune microenvironment in DLBCL (2022)
  • 著者名/発表者名: 湯淺 光博
  • 学会等名: 第81回日本癌学会学術集会